煙葉增香微生物優(yōu)異菌株及誘香配套技術(shù)研究.pdf

1、本研究從福建邵武產(chǎn)倉(cāng)貯期煙葉中以及福建農(nóng)林大學(xué)煙草試驗(yàn)田土壤中分離獲得微生物菌株,分別在煙葉的倉(cāng)貯期,田間生長(zhǎng)期,醇化發(fā)酵期進(jìn)行微生物菌劑的增香增質(zhì)實(shí)驗(yàn),通過對(duì)煙葉內(nèi)主要化學(xué)成分含量、香氣前體物質(zhì)含量的變化情況進(jìn)行分析,同時(shí)結(jié)合煙草專家感官評(píng)吸得分,發(fā)掘出具有較高實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的微生物菌株:并對(duì)發(fā)掘出的微生物菌株進(jìn)行了酶學(xué)機(jī)理,生物學(xué)特性,微觀形態(tài)等方面的研究,優(yōu)化各微生物菌株的發(fā)酵工藝參數(shù)(pH,時(shí)間,溫度,培養(yǎng)基成分等),為將來的生產(chǎn)

2、應(yīng)用打好理論基礎(chǔ)。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1從各個(gè)樣品中分離純化得到細(xì)菌153株,真菌91株。在對(duì)倉(cāng)貯期煙葉進(jìn)行增香增質(zhì)實(shí)驗(yàn)后,通過測(cè)定煙葉中主要化學(xué)成分(包括可溶性多糖,還原糖,總氮,煙堿,蛋白質(zhì)等)的變化情況,多種香氣前體物(多酚,石油醚提取物,淀粉,類胡蘿卜素,有機(jī)酸等)的變化情況,結(jié)合煙草專家的感官評(píng)吸得分,初步篩選出TZ62,TZ14,TZ11,TX34,TX77,TX94,TX119。這七株菌株處理

3、過的煙葉主要化學(xué)成分含量大多較為適宜;糖氮比,糖煙堿比等趨近于優(yōu)質(zhì)煙的比值。煙草專家評(píng)吸結(jié)果顯示:經(jīng)此七種菌劑處理過的煙葉,香氣細(xì)膩,香氣量有所增加;余味更加舒適;雜氣量,刺激性有所下降;燃燒性較為適中。
　　 2將篩選出的部分微生物菌株TZ62,TZ11,TZ14應(yīng)用于田間生長(zhǎng)期煙葉正交增香試驗(yàn),通過對(duì)田間生長(zhǎng)期煙葉各項(xiàng)指標(biāo)的綜合分析,結(jié)果表明:菌株TZ62,TZ11,TZ14可有效改善煙葉內(nèi)在品質(zhì),提高煙葉的可用性。與對(duì)照相

4、比,微生物菌劑處理過的煙葉糖氮比,糖煙堿比等多項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于對(duì)照處理。適合田間生長(zhǎng)期上部葉的增香增質(zhì)試驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)方案是:A2B2C3,即菌株TZ11,菌劑濃度6.0×109 CUF/ml,噴灑3次。
　　 3將篩選出的部分微生物菌株TX34,TX119,TX77,TX94.應(yīng)用于醇化發(fā)酵期煙葉正交增香實(shí)驗(yàn),通過對(duì)醇化發(fā)酵期煙葉各項(xiàng)指標(biāo)的綜合分析,結(jié)果表明:經(jīng)過菌株TX34,TX119,TX77,TX94的處理,煙葉內(nèi)主要化學(xué)成分

5、含量變化明顯,更加趨近于優(yōu)質(zhì)煙的含量水平;香氣前體物質(zhì)含量與對(duì)照相比有了一定的增多;微生物處理過的煙葉糖氮比,糖煙堿比等多項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于對(duì)照處理。適合醇化發(fā)酵期煙葉的增香增質(zhì)試驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)方案是:A1B3C1D4E2,即菌株TX34,菌劑濃度為9.0×109 CUF/ml,緩沖液pH值為6.5,發(fā)酵溫度28℃,發(fā)酵時(shí)間12天。
　　 4對(duì)增香增質(zhì)效果較好的微生物菌株TX34,TX119,TX77,TX94的生物學(xué)特性、生理生化指標(biāo)

6、及微觀形態(tài)進(jìn)行了研究,闡明適宜四種微生物菌株生長(zhǎng)的溫度、pH值、滲透壓、培養(yǎng)基配方等,為優(yōu)化各菌株適宜的發(fā)酵工藝參數(shù)提供了理論依據(jù)。
　　 5對(duì)增香增質(zhì)效果較好的微生物菌株TX34,TX119,TX77,TX94進(jìn)行了增香機(jī)理的酶學(xué)研究,測(cè)定了煙葉內(nèi)與香氣前體物質(zhì)有關(guān)的5種活性酶(主要包括α-淀粉酶、纖維素酶、蛋白酶、多酚氧化酶和過氧化物酶)在醇化發(fā)酵過程中酶的活性的變化情況。研究結(jié)果表明:經(jīng)過微生物菌株處理的煙葉中各種酶的活性