商品肉牛黏膜IgA的檢測及分析.pdf

1、黏膜是動物有機體與外界環(huán)境相隔的最大屏障，是病原體入侵的最大門戶。黏膜免疫系統(tǒng)是指外周淋巴器官中的黏膜部分，分主抗原接觸部分和初次應(yīng)答誘導(dǎo)部位以及一些大的表面區(qū)域(消化道、呼吸道、泌尿生殖道、外分泌腺等)。黏膜免疫是有機體抵御感染的最重要手段。黏膜免疫的主要效應(yīng)因子是分泌型IgA(Secretory IgA)，不僅可以中和、排斥病原體、防止細(xì)菌、病毒與黏膜結(jié)合，而且還可以促進外分泌液中天然抗菌因子作用，并可調(diào)節(jié)黏膜免疫。黏膜免疫由于它的

2、特殊地位，在機體與外界環(huán)境相互作用中發(fā)揮著重要作用，黏膜免疫系統(tǒng)中的免疫活性成份越來越引起人們的重視。 本文通過雙抗體夾心ELISA檢測商品肉牛的口腔、胃(瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃)、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、鼻、支氣管、肺、膀胱、尿液、淚液、膽汁、扁桃體等器官的分泌液中的IgA含量，來反映黏膜抗體IgA在消化道、呼吸道、泌尿生殖道等組織器官的大致分布狀況。全文共分三部分： 前言：概述了黏膜免疫系統(tǒng)及其功能，

3、黏膜免疫應(yīng)答的過程，黏膜免疫的細(xì)胞免疫和體液免疫等。黏膜免疫系統(tǒng)的研究不僅為傳統(tǒng)的免疫學(xué)增加新內(nèi)容，也為很多疾病的致病機理、病原與宿主的關(guān)系、疾病診治、新型疫苗與預(yù)防制劑等研究提供了新的思路與方法。 正文：本研究將牛初乳經(jīng)10000r/min離心所得的乳清過葡聚糖G-200凝膠層析柱得IgA和IgG混合蛋白，再過纖維素DEAE-52柱純化牛IgA，經(jīng)SDS-PAGE電泳鑒定為電泳純IgA。免疫兔制備兔抗牛IgA抗體，然后用辣根過

4、氧化酶標(biāo)記，制備兔抗牛IgA酶標(biāo)抗體。同時將牛IgA免疫小鼠，制備出小鼠抗牛IgA抗體，應(yīng)用本實驗建立的雙抗體夾心ELISA對采集的各黏膜部位(每個部位30個樣品)進行檢測。詳述檢測結(jié)果，由雙抗體夾心ELISA OD值與IgA含量回歸方程得到各部位IgA含量，并討論。 結(jié)論：成功的建立了檢測肉牛黏膜IgA的雙抗體夾心ELISA方法。根據(jù)建立的方法檢測樣品，結(jié)果顯示：消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、淚液、膽汁、扁桃體黏膜部位的分泌液