肺泡巨噬細(xì)胞源性基質(zhì)金屬蛋白酶在慢性阻塞性肺疾病發(fā)病機制中的作用的研究.pdf

1、慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease，COPD)是引起全世界呼吸系疾病發(fā)病率和死亡率不斷上升的重要原因。進(jìn)行性的氣流受限所致的肺功能下降是COPD患者特征性的臨床表現(xiàn)，目前對COPD的藥物治療主要是緩解癥狀或減少并發(fā)癥，而無有效的方法以阻止其肺功能進(jìn)行性的下降。吸煙是引起COPD的最主要的危險因素；彈性物質(zhì)的降解則是COPD的特征性的病理表現(xiàn)?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetallop

2、roteases，MMPs)是一類高度保守的依賴于鋅離子和鈣離子的內(nèi)切蛋白水解酶家族，能夠降解彈性蛋白、蛋白聚糖、Ⅳ型膠原等細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)成分。近年來研究發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶在由先天性血清α1-AT(α1-antitrypsin，α1-AT)缺乏所致的COPD的發(fā)病中起著重要作用；而在吸煙相關(guān)的COPD中，肺泡巨噬細(xì)胞(alveolarmacrophages，AM)及MMPs的作用越來越

3、引起人們關(guān)注。因此，本課題主要研究了香煙煙霧和TNF-α對AM源性MMPs表達(dá)的影響以及核因子κB(nuclearfactorkappaB，NF-κB)介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在MMPs表達(dá)中的作用，從而為COPD的防治提供新的策略。 第一部分被動吸煙大鼠巨噬細(xì)胞源性基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)及N-乙酰半胱氨酸對之的影響 分題一香煙煙霧提出物對大鼠肺泡巨噬細(xì)胞活性及基質(zhì)金屬蛋白酶9和組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1平衡的影響 目的

4、： 探討煙霧對肺泡巨噬細(xì)胞源性基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1(TIMP-1)表達(dá)的影響及其在慢性阻塞性肺疾病(COPD)發(fā)病中的作用。 結(jié)論： CSM能誘導(dǎo)AM源性MMP-9和TIMP-1mRNA的表達(dá)，并導(dǎo)致其平衡失調(diào)；CSM誘導(dǎo)的AM源性MMP-9和TIMP-1之間的平衡失調(diào)在吸煙相關(guān)的COPD發(fā)病中可能起著重要作用。 分題二N-乙酰半胱氨酸對吸煙大鼠巨噬細(xì)胞源性明膠酶和巨

5、噬細(xì)胞彈性蛋白酶表達(dá)的影響 目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)對香煙煙霧提出物誘導(dǎo)的吸煙大鼠肺泡巨噬細(xì)目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)對香煙煙霧提出物誘導(dǎo)的吸煙大鼠肺泡巨噬細(xì)胞源性明膠酶、巨噬細(xì)胞彈性蛋白酶mRNA表達(dá)及明膠酶活性的影響。 結(jié)論 NAC在一定程度上可以抑制CSM誘導(dǎo)的AM源性MMP-2、MMP-9、MMP-12mRNA的表達(dá)，且使明膠酶活性水平相應(yīng)降低。 第二部分TN

6、F-α誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬細(xì)胞源性基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究 分題一核因子κB在TNF-α誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬細(xì)胞源性基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)中的作用 目的 探討核因子κB(NF-κB)介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在TNF-α誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬細(xì)胞(AM)源性基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)表達(dá)中的作用。 結(jié)論 TNF-α能上調(diào)AM源性MMP-9、MMP-2和

7、TIMP-1mRNA的表達(dá)；PDTC和NAC則能抑制TNF-α刺激誘導(dǎo)的AM源性MMP-9mRNA和蛋白的表達(dá)；NF-κB介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在TNF-α誘導(dǎo)的AM源性MMP-9的表達(dá)中起著重要作用。 分題二吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽和N-乙酰半胱氨酸抑制核因子κB活化的作用機理研究 目的 研究吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(PDTC)或N-乙酰半胱氨酸(NAC)對TNF-α或IL-1誘導(dǎo)的IKKα、IKKβ和IκBα的磷酸化及N

8、F-κB活化的影響，從而探討PDTC和NAC抑制NF-κB活化的藥學(xué)機理。 結(jié)論 NAC能抑制引起IKK活化的上游，從而阻斷TNF-α刺激的NF-κB的活化過程；PDTC則通過抑制IκBα的降解、阻止IκB和NF-κB復(fù)合體的解離，從而抑制NF-κB的活化。NAC和PDTC作為NF-κB活化的抑制劑，與其抗氧化特性無直接關(guān)系。 第三部分核酸鎖修飾的核因子κB誘捕寡核甘酸對肺泡巨噬細(xì)胞源性基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)的影響