版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、鏈球菌是引起魚類疾病的重要病原菌之一,許多養(yǎng)殖和野生品種的魚類都對鏈球菌敏感,包括牙鲆、大菱鲆、銀鮭、羅非魚、虹鱒和美國紅魚等三十多種。本論文研究了感染牙鲆的豚鏈球菌的致病性和類M蛋白等方面的工作。對從患病牙鲆上分離的3株鏈球菌進(jìn)行了人工感染實(shí)驗(yàn),生理生化實(shí)驗(yàn)鑒定為豚鏈球菌(Streptococcus iniae)。用該菌免疫兔和大鼠制備抗血清,間接免疫熒光抗體方法檢測抗血清的特異性。用熱酸法、熱堿法和胃蛋白酶消化法提取豚鏈球菌NUF8
2、49的類M蛋白,SDS-PAGE和Western-blot方法分析比較各方法的差異性。而后采用熱酸法提取主要兩種鏈球菌的類M蛋白,分析主要類M蛋白的結(jié)構(gòu)組成及其抗原性。將熱酸抽提的類M蛋白、弱毒菌株NUF693分別免疫牙鲆,通過對牙鲆的保護(hù)率初步探討鏈球菌的類M蛋白的抗原性和免疫保護(hù)力。具體方法和結(jié)果如下: 本研究對從患病牙鲆上分離的3株鏈球菌進(jìn)行了人工感染實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示,NUF849為較強(qiáng)毒力的菌株,半致死量LD50為3.7×
3、105CFU/尾,NUF693和NUF701半致死量LD50分別為1.4×107CFU/尾和4.6×107CFU/尾,為毒力較弱的菌株。三株細(xì)菌采用常規(guī)生理生化及API系統(tǒng)鑒定,最終判定3株細(xì)菌均為豚鏈球菌(Streptococcus iniae)。 用菌株NUF849的全菌免疫新西蘭白兔和健康大鼠,發(fā)現(xiàn)其能有效刺激新西蘭白兔和大鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng),獲得抗血清。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測得血清抗體效價分別為1600和800。
4、免疫熒光抗體技術(shù)(IFAT)檢測表明鼠抗血清與NUF849發(fā)生特異性結(jié)合,與停乳鏈球菌發(fā)生部分交叉反應(yīng),與弧菌屬的部分細(xì)菌沒有交叉。 分別用熱酸抽提法、堿抽提法和胃蛋白酶消化法分離豚鏈球菌NUF849的類M蛋白,通過SDS-PAGE和Western-blot印跡法分析比較三種方法所提類M蛋白的組成和抗原性差異。結(jié)果表明,不同方法提取的類M蛋白結(jié)構(gòu)組成和抗原性均不同。熱酸抽提法分離制備的類M蛋白得率和純度都較其它兩種方法高,蛋白的
5、抗原性保持較好。采用熱酸提取法提取5株豚鏈球菌NUF633、NUF693、NUF701、NUF812、NUF849和2株停乳鏈球菌SD、L2的類M蛋白,其SDS-PAGE圖譜明顯不同,種間差異明顯。Western-blot結(jié)果顯示,兔抗豚鏈球菌血清可與豚鏈球菌的兩條類M蛋白帶結(jié)合,分子量分別為60和37kDa;與停乳鏈球菌的兩條類M蛋白帶結(jié)合,分子量為68和37kDa。兩種鏈球菌主要類M蛋白組成及其抗原性差異明顯。分子量37kDa的類M
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 牙鲆彈狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白(NV)的表達(dá)及抗原性初步分析.pdf
- 豬鏈球菌反應(yīng)調(diào)節(jié)因子CovR重組蛋白及其抗體的制備.pdf
- A組鏈球菌的M蛋白基因(emm)分型技術(shù)的應(yīng)用.pdf
- 人感染豬鏈球菌病
- 肺炎鏈球菌PsaA抗原及其在結(jié)合疫苗中的應(yīng)用.pdf
- 化膿性鏈球菌表面蛋白Fba的免疫原性研究.pdf
- 肺炎鏈球菌毒力蛋白基因工程疫苗優(yōu)勢抗原篩選.pdf
- 鏈球菌、腸球菌
- 海豚鏈球菌(Strepstococcus iniae)胞外產(chǎn)物的特性及其對牙鲆的免疫效應(yīng).pdf
- 藍(lán)舌病病毒VP3、5、7蛋白及小反芻獸疫病毒H蛋白的原核表達(dá)及其抗原性分析.pdf
- 肺炎鏈球菌體蛋白LytA和CbpA對感染小鼠的診斷價值.pdf
- PCR法鑒定變形鏈球菌與遠(yuǎn)緣鏈球菌的研究.pdf
- 羅非魚無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)LrrG蛋白的原核表達(dá)及其免疫原性研究.pdf
- 溶藻弧菌外膜蛋白的抗原性分析及其亞單位疫苗的研制.pdf
- 葡聚糖結(jié)合蛋白A葡聚糖結(jié)合區(qū)融合蛋白及其抗體對變形鏈球菌黏附的影響.pdf
- 糖基化對卵白蛋白的構(gòu)象及其抗原性和過敏原性的影響.pdf
- 致病性副溶血弧菌脂多糖對牙鲆的免疫效應(yīng)及其抗原性研究.pdf
- 馬鏈球菌獸疫亞種類M蛋白對細(xì)胞的粘附作用.pdf
- 肺炎鏈球菌ZmpB蛋白疫苗的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 鏈球菌M蛋白同源角蛋白多肽在銀屑病發(fā)病中的作用研究.pdf
評論
0/150
提交評論