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1、目的: 研究屬于中醫(yī)清熱解毒類(lèi)藥物的加味黃連解毒湯(Modified HLJDT)對(duì)人多發(fā)性骨髓瘤(MM)RPMI8226細(xì)胞的影響,并探討對(duì)MM細(xì)胞中具干細(xì)胞特性的側(cè)群細(xì)胞的影響。 方法: 用加味黃連解毒湯的甲醇提取物,以二甲基亞砜(DMSO)溶解后稀釋成實(shí)驗(yàn)所需的藥物濃度,以含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)RPMI8226細(xì)胞,選處于指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞種在孔板內(nèi),分別以不同濃度的加味黃連解毒湯干
2、預(yù)24小時(shí)后,應(yīng)用倒置顯微鏡觀察多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量的變化;應(yīng)用MTS染料檢測(cè)加味黃連解毒湯作用于多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞RPMI8226后24小時(shí)和36小時(shí)的生長(zhǎng)抑制情況;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)加味黃連解毒湯作用于多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細(xì)胞24小時(shí)后細(xì)胞的凋亡情況;采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定藥物作用于多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細(xì)胞24小時(shí)后細(xì)胞DNA增殖和細(xì)胞周期的變化;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物對(duì)多發(fā)性骨髓瘤RPMI8226細(xì)
3、胞中具干細(xì)胞特性的側(cè)群細(xì)胞(SP)的影響。 結(jié)果: 與對(duì)照組相比,8μg/ml-500μg/ml加味黃連解毒湯能抑制人多發(fā)性骨髓瘤(MM)RPMI8226細(xì)胞增殖,并呈現(xiàn)明顯的時(shí)間和劑量相關(guān)性(P<0.05);10μg/ml-200μg/ml能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,呈現(xiàn)明顯的劑量相關(guān)性(P<0.05);125μg/ml-500μg/ml抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成進(jìn)而使腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)阻滯在G1/G0期,呈現(xiàn)明顯的劑量相關(guān)性(P<0
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