DNA錯配修復基因缺陷的MSI-H大腸癌頻發(fā)Ki-ras基因點突變.pdf

1、　　目的：Ki-ras突變是在大腸癌較常見的現(xiàn)象。Ki-ras變異熱點12號密碼子的多種突變均可不同程度的導致細胞轉(zhuǎn)化，細胞獲得生長優(yōu)勢終致癌變。本試驗擬通過12號密碼子突變譜反映基因組中的大量突變現(xiàn)象，并分析其與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性相關性。本研究旨在揭示微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的本質(zhì)和起源，以及DNA錯配修復缺陷對大腸癌發(fā)生的影響。 方法：1)HRFMA法測定大腸癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性。2)PCR擴增Ki-ras第一外顯子12，13密碼子為中心的堿

2、基序列。2種引物直接測序法Ki-ras12，13密碼子部位測序。3)MSI-H大腸癌的hMLH1和hMSH2基因全長測序。4)統(tǒng)計分析卡方檢驗及Fisher精確校驗。 結論：1.Ki-ras12和13號密碼子突變率在MSI-H，MSI-L及MSS大腸癌間無顯著差異。2.微衛(wèi)星不穩(wěn)定性大腸癌中檢出的Ki-ras突變譜多為轉(zhuǎn)換突變。這從一個方面證明了DNA錯配修復缺陷與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及點突變率提升的相關。3.MSI-H大腸癌中檢出一