纖維蛋白原降解產物對巨噬泡沫細胞形成和功能的作用.pdf

1、動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是心腦血管疾病的主要病理基礎，其發(fā)病機制尚不明確，目前炎癥損傷反應學說得到人們的公認，認為AS的發(fā)病過程是一種慢性的炎癥反應。巨噬源性泡沫細胞在AS病理過程中起重要作用，巨噬泡沫細胞的形成及其作用是AS斑塊損傷形成、發(fā)展和崩解的關鍵。 近年來，AS流行病學調查研究表明血漿高水平纖維蛋白原降解產物(fibrinfibrinogendegradationproducts，F(xiàn)FDP)

2、是一重要、獨立的心腦血管疾病危險相關因素。通常FFDP以及其組分D-dimer被認為是凝血活性指標，因為它們常常是高血凝過程前后的關鍵性因素。目前，越來越多的證據(jù)表明FFDP和D-dimer不僅與凝血過程有關，而且與AS炎癥反應相關。 本課題旨在研究FFDP對AS過程中巨噬源性泡沫細胞形成和功能的影響。研究結果主要概括為以下四個方面： 1.采用人類單核細胞系U937細胞與ox-LDL共孵育，培養(yǎng)為U937泡沫細胞。收集的

3、U937泡沫細胞采用油紅O染色后，光鏡下觀察，胞漿內出現(xiàn)的明顯紅染脂質顆粒，符合泡沫細胞形態(tài)特征。采用流式細胞儀檢測清道夫受體的表達，結果顯示FFDP刺激可使清道夫受體表達量顯著升高。同時，F(xiàn)FDP刺激后能顯著促進單核巨噬細胞吞噬氧化低密度脂蛋白形成泡沫細胞。 2.體外原代培養(yǎng)兔主動脈內皮細胞，測定U937細胞與內皮間粘附率。對照組U937細胞與內皮細胞粘附率為8.04％。結果表明，經FFDP處理后，U937細胞與血管內皮細胞粘

4、附有顯著的增加。FFDP50μg/L組的粘附率為26.9％；100μg/L組的粘附率為34.2％；150μg/L組的粘附率為36.3％；300μg/L組的粘附率為44.8％。 3.采用美國SuperArray公司動脈粥樣硬化疾病基因芯片OligoAtherosclerosisMicroarray(OHS-038)研究纖維蛋白原降解產物中D-dimer組分對巨噬細胞動脈粥樣硬化相關128個基因表達的調控作用。D-dimer刺激后，

5、27個基因在芯片中顯著上調，其上調量與對照的U937細胞相比超過2倍。我們將顯著改變的基因按照其功能分為粘附分子、胞外間質分子、脂質轉運代謝基因、細胞生長分化基因、核轉錄調節(jié)因子和氧化應激相關蛋白6類。 4.采用SYBRreal-timePCR方法，進一步將VCAM1，MMP-9，OLR1，VEGFa和PPARa進行了mRNA表達水平的確認，結果與芯片結果一致，證明D-dimer能顯著調控VCAM1，MMP-9，OLR1，VEG