三氧化二砷對(duì)黑色素瘤B-16細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 觀察三氧化二砷(ArsenicTrioxide，AT)對(duì)體外培養(yǎng)黑色素瘤B16細(xì)胞增殖和凋亡的影響，探討三氧化二砷抗腫瘤的機(jī)制。 方法： 1.應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力。 2.采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期及凋亡率。 3.倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化和凋亡特征。 4.應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微術(shù)，結(jié)合特異性熒光探針Fluo-3/AM、H2DCF-DA和DAF-FM-DA,觀察AT引起

2、瘤細(xì)胞內(nèi)Ca2+、ROS和NO的變化及hoechst33258染色觀察細(xì)胞凋亡的核形態(tài)學(xué)改變。 結(jié)果： 1.6.25.100μmol/LAT作用細(xì)胞24、48小時(shí)后，細(xì)胞增殖活力明顯下降，且具有時(shí).效和量一效依賴關(guān)系。 2.50umol/LAT作用細(xì)胞12小時(shí)后，細(xì)胞凋亡率增加，S期細(xì)胞百分率明顯下降。 3.50umol/LAT作用細(xì)胞12小時(shí)后，倒置顯微鏡下可見細(xì)胞生長(zhǎng)密度減小、細(xì)胞突起減少、形態(tài)變圓、