促進造血干細胞增殖與血紅蛋白合成營養(yǎng)組合物的實驗研究.pdf

1、目的： 以乙酰苯肼、X射線、環(huán)磷酰胺聯(lián)合應用的方法建立小鼠再生障礙性貧血動物模型，用以評價促進造血干細胞增殖與血紅蛋白合成營養(yǎng)組合物對小鼠再生障礙性貧血造血功能的影響。 方法： BALB/c小鼠100只，適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分為：正常對照組、再障模型組及不同劑量的營養(yǎng)組合物組。采用皮下注射乙酰苯肼100mg/kg，次日X射線2.0Gy照射后，于試驗第5天環(huán)磷酰胺80 mg/Kg腹腔注射，第15天重復以上步驟但不

2、給予射線處理的方法建立再生障礙性貧血小鼠模型，以鉛磚屏蔽施以假照射及單純等量生理鹽水相應部位注射為正常對照組。試驗第7天開始，營養(yǎng)組合物高、中、低劑量組小鼠每天灌胃，分別給予1445.55，963.7，674.59 mg/(kg·d)營養(yǎng)組合物，直至第45天，頸椎脫臼法處死小鼠，觀察試驗小鼠的血象、骨髓象、造血細胞內的線粒體、造血干細胞集落的形成及肝臟、脾臟的病理變化。 結果： 1．試驗第7天，與正常對照組比較，其余各組

3、小鼠陸續(xù)出現皮毛凌亂，光澤度降低，反應遲鈍，行動遲緩，飲食量減少，其中以再障模型組最為明顯，不同劑量的營養(yǎng)組合物組與再障模型組比較，小鼠精神狀態(tài)漸佳，進食量增大。此外，再障模型組小鼠體重與正常對照組相比下降明顯(*p<0.05)。各營養(yǎng)組合物組體重較模型對照組明顯增高(*p<0.05)。 2．與正常對照組比較，再障模型組小鼠外周血象三系細胞顯著降低(*p<0.01)；與再障模型組比較，營養(yǎng)組合物高、中、低劑量組均能顯著提高再障小

4、鼠外周血象三系細胞水平(*p<0.01)。外周血涂片顯示，與正常對照組相比，再障模型組小鼠白細胞減少，其中以中性粒細胞減少尤為明顯，而淋巴細胞比例相對增多；不同劑量的營養(yǎng)組合物組與正常對照組則無顯著性差異(*p<0.05)。再障模型組小鼠促紅細胞生成素(EPO)含量明顯高于正常對照組，且EPO與RBC、 Hb均呈負相關。而不同劑量的營養(yǎng)組合物組與再障模型組比較，促紅細胞生成素(EPO)由于代償作用含量降低(*p<0.01)；并呈劑量-效

5、應關系。 3．再障模型組小鼠骨髓有核細胞數與正常對照比較，顯著減少(*p<0.01)；與再障模型組的骨髓有核細胞數比較，營養(yǎng)組合物各劑量組骨髓有核細胞數增加(*p<0.05)。骨髓透射電鏡顯示，不同劑量的營養(yǎng)組合物組與再障模型組比較，同類造血細胞內線粒體數目明顯增多(*p<0.01)。 4．造血干細胞集落實驗證明，再障模型組小鼠造血干細胞集落的數量明顯減少，與正常對照組比較差異顯著(*p<0.01)：營養(yǎng)組合物高、中、低

6、劑量組干細胞集落形成率均明顯高于再障組(*p<0.01)，且呈劑量-效應關系。 5．肝、脾的病理切片顯示，再障模型組小鼠肝臟組織水腫明顯，小葉結構欠清晰，肝血竇及中央靜脈擴張、充血；脾組織結構疏松，脾小體個數減少。不同劑量的營養(yǎng)組合物組與再障模型組相比，肝臟組織水腫減輕，小葉結構明顯清晰，肝細胞形態(tài)正常；脾臟雖仍有部分充血，但脾小體個數較再障模型組明顯增多。 結論： 1．采用乙酰苯肼、X射線、環(huán)磷酰胺聯(lián)合應用的方