干擾素誘導(dǎo)的MyD88蛋白抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的研究.pdf

1、為了解IFN抗病毒的機(jī)制及HBV持續(xù)存在對IFN效應(yīng)基因表達(dá)的影響,該研究首先應(yīng)用含有14112個(gè)靶基因的人cDNA微點(diǎn)陣芯片檢測了HepG2細(xì)胞和來源于HepG2細(xì)胞并整合有HBV基因組的HepG2.2.15細(xì)胞經(jīng)IFN-α處理6h前后基因表達(dá)譜的差異.結(jié)果發(fā)現(xiàn),許多與細(xì)胞周期、增殖、凋亡相關(guān)的基因及部分EST和功能未知基因受IFN-α調(diào)節(jié);IFN-α誘導(dǎo)后,一些與激酶和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、抗原遞呈和處理相關(guān)的基因在兩株細(xì)胞間表達(dá)存在

2、差異,提示HBV影響IFN-α誘導(dǎo)的細(xì)胞基因的表達(dá).例如,與HepG2細(xì)胞相比,在HBV持續(xù)復(fù)制的HepG2.2.15細(xì)胞中,IFN-α誘導(dǎo)的髓樣細(xì)胞分化蛋白(MyD88)的基因表達(dá)顯著降低,提示HBV復(fù)制可能抑制MyD88基因的表達(dá).進(jìn)一步應(yīng)用核苷類似藥物L(fēng)amivudine和Adefovir抑制HepG2.2.15細(xì)胞中HBV復(fù)制,再用IFN-α處理細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)HepG2.2.15細(xì)胞中MyD88基因的表達(dá)顯著增加,由此確認(rèn)HBV可抑

3、制IFN-α誘導(dǎo)的MyD88基因的表達(dá),這也提示MyD88蛋白可能在IFN-α誘導(dǎo)的抗HBV效應(yīng)中發(fā)揮重要的作用.目前已知,MyD88蛋白是Toll樣受體、白介素-1受體、白介素-18受體介導(dǎo)的信號(hào)通路中的關(guān)鍵分子,由它參與構(gòu)成的信號(hào)級(jí)聯(lián)最終引起核因子kappa B(Nuclear factor-kappa B,NF-kB)依賴性信號(hào)通路的活化.然而,有關(guān)MyD88蛋白在干擾素信號(hào)系統(tǒng)中的作用以及MyD88蛋白的抗病毒功能未見報(bào)道.為了

4、探討MyD88蛋白在IFN-α誘導(dǎo)的抗HBV效應(yīng)中的作用,該研究進(jìn)一步在HepG2細(xì)胞中建立MyD88穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,然后用HBV復(fù)制型質(zhì)粒轉(zhuǎn)染該細(xì)胞株,研究MyD88蛋白對HBV復(fù)制的影響.通過上述工作,該研究證實(shí)IFN-α誘導(dǎo)MyD88基因的表達(dá)可被HBV復(fù)制所抑制,這可能部分解釋HBV抗干擾素作用的機(jī)制;提出了一個(gè)新的IFN-α抑制HBV復(fù)制的機(jī)制,它由IFN-α誘導(dǎo)的MyD88蛋白介導(dǎo),通過激活NF-kB信號(hào)系統(tǒng)從而影響HBV