ISSR在食用菌遺傳多樣性研究中的應(yīng)用.pdf

1、本研究以黑木耳(Auicularia auricula)、白靈菇(Pleurotus nebrodensis)、灰樹(shù)花(Grifolafrondosa)、金針菇(Flammulina velutipes)、滑菇(Pholiota nameko)、茶樹(shù)菇(Agrocybe cylindracea)、杏鮑菇(Pleurotus eryngii)和雞腿菇(Coprinus comatus)等8種食用菌105個(gè)菌株為材料,針對(duì)菌絲體中多糖等物質(zhì)

2、豐富的特點(diǎn),改進(jìn)DNA提取方法,獲得高質(zhì)量DNA;設(shè)計(jì)引物,優(yōu)化反應(yīng)體系和擴(kuò)增條件,進(jìn)行ISSR遺傳多樣性分析,形成了適合多種食用菌菌株遺傳鑒別鑒定和遺傳分析的技術(shù)和方法. 　研究表明,我國(guó)食用菌栽培菌株遺傳多樣性豐富,多數(shù)種內(nèi)不同菌株之間遺傳距離在0.4以上.21個(gè)黑木耳(A.auricula)菌株,10個(gè)引物擴(kuò)增出185個(gè)位點(diǎn),多態(tài)性位點(diǎn)比例(P)為97.84﹪,平均每個(gè)位點(diǎn)的觀(guān)察等位基因數(shù)(Na)為1.9784,平均每個(gè)位點(diǎn)

3、的有效等位基因數(shù)(Ne)為1.2396,Nei's基因多樣性(H)平均為0.2732,Shannon's信息指數(shù)(,)為0.4278,省際間菌株基因流(Nm)值為2.7528;20株白靈菇(P.nebrodensis),11個(gè)引物共擴(kuò)增出70個(gè)位點(diǎn),P為75.71﹪,Na為1.757l,Ne為1.5310,H為0.2967,為0.4324;13株灰樹(shù)花(G..frondosa),12個(gè)引物共擴(kuò)增出178個(gè)位點(diǎn),p為84.83 9,6,N

4、a為1.8483,Ne為1.3245,H為0.1988,,為0.3168;12個(gè)ISSR引物將13個(gè)金針菇(F velutipes)菌株擴(kuò)增出124個(gè)位點(diǎn),P為91.94﹪,Na為1.9194,Ne為1.4819,H平均為0.2844,,為0.4313;16個(gè)引物將12株滑菇(P nameko)擴(kuò)增出146個(gè)位點(diǎn),P為86.99﹪,Na為1.8699,Ne為1.3880,H為0.2395,,為0.3733;13個(gè)引物將10株茶樹(shù)菇(A.

5、cylindracea)擴(kuò)增出194個(gè)位點(diǎn),P為87.63﹪,Na為1.8763,Ne為1.4455,H為0.2669,I,為0.4095;9株杏鮑菇(P eryngii),13個(gè)引物擴(kuò)增出250個(gè)位點(diǎn),P為90.8096,Na為1.9080,Ne為1.3722,H為0.2388,,為0.3803;7株雞腿菇(C comatus),14個(gè)引物擴(kuò)增出141個(gè)位點(diǎn),P為70.21﹪,Na為1.6474,Ne為1.2931,H為0.1803,

6、I為0.2828.基于菌株間Nei'遺傳距離的LJPGMA聚類(lèi)分析表明,我國(guó)栽培食用菌菌株的分布與地理區(qū)域無(wú)關(guān),表明我國(guó)食用菌菌株適應(yīng)栽培地域性強(qiáng),生產(chǎn)菌株在全國(guó)范圍內(nèi)引種頻繁.　　以白靈菇和杏鮑菇為材料,進(jìn)行酯酶同工酶分析,將分析結(jié)果與ISSR分析結(jié)果相比較,結(jié)果表明兩種方法對(duì)菌株的分析結(jié)果大致相同,都是鑒別菌株的良好方法,但對(duì)遺傳關(guān)系的分析結(jié)果有差異. 對(duì)不同白靈菇菌株的ISSR擴(kuò)增位點(diǎn)進(jìn)行連接、轉(zhuǎn)化、克隆、測(cè)序,獲得了24