卵黃抗體抑制胃內(nèi)幽門螺桿菌致病作用的研究.pdf

1、目前世界上感染幽門螺桿菌的人越來越多，傳統(tǒng)的抗生素療法由于耐藥株的增多限制了它的治療效果，尋找高效、低毒、廉價(jià)的抗幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，H.pylori)的防治方法已經(jīng)迫在眉捷。本試驗(yàn)以幽門螺桿菌NCTCll637為材料，采用不同培養(yǎng)基對(duì)H.pylori進(jìn)行培養(yǎng)，以研究不同培養(yǎng)基對(duì)H.pylori生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：(1)采用固體培養(yǎng)H.pylori時(shí)，在微需氧條件下，培養(yǎng)基分別為哥倫比亞瓊脂+混合抗生素+

2、6％脫纖維山羊血，哥倫比亞瓊脂+混合抗生素+6％兔血清，37℃培養(yǎng)4d，均可培養(yǎng)出H.pylori；在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下，不添加混合抗生素，培養(yǎng)基為哥倫比亞瓊脂+6％兔血清，對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)沒有影響，且不會(huì)造成雜菌污染。(2)采用液體培養(yǎng)H．pylori時(shí)，培養(yǎng)基為布氏肉湯基礎(chǔ)加混合抗生素和6％山羊血清，H.pylori增菌迅速。菌株采取冷凍保存液法保存于-70℃-80℃低溫條件下，可以成功復(fù)蘇。 利用蒙古沙土鼠(MG)建立H.pyl

3、ori NCTC11637株胃內(nèi)感染模型。感染方法有兩種，一種方法是MG禁食18h后用50％酒精0.5ml預(yù)處理，6h后接種H.pylori，間隔12、24h分別再次接種。另一種方法的接種方法與前述的方法相同，但接種后每日口服雷尼替丁5mg/kg體重。胃內(nèi)接種H.pylori后，于第7d、15 d、35 d、45 d分別用幽門螺桿菌抗原酶聯(lián)免疫法診斷試劑盒、細(xì)菌培養(yǎng)和胃組織切片的方法檢測(cè)胃內(nèi)是否己感染，觀察MG胃內(nèi)細(xì)菌感染情況和胃病理組

4、織學(xué)變化。結(jié)果表明，胃內(nèi)灌服酒精損傷胃粘膜與每日口服雷尼替丁相結(jié)合，在人工感染35 d后，胃內(nèi)有大量H.pylori感染定植，胃組織固有層有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和腸化生現(xiàn)象。 利用蒙古沙土鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，觀察H.pylori特異卵黃抗體對(duì)胃內(nèi)H.pylori感染的治療效果。實(shí)驗(yàn)鼠間隔48h兩次口服接種H.pylori(NCTCll637)布氏培養(yǎng)液1ml(1.15×108CFU)，首次接種7 d后將實(shí)驗(yàn)鼠隨機(jī)分為四組(15只/組)，

5、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別灌服生理鹽水、復(fù)合抗菌素和抗H.pylori卵黃抗體，1次/天，連續(xù)12 d；Ⅳ組間隔48h皮下注射抗H.pylori卵黃抗體兩次。在用藥前實(shí)驗(yàn)鼠胃內(nèi)均有大量H.pylori定植，感染率100％；用藥后第14 d，Ⅱ組鼠的H.pylori清除率為60％；Ⅲ組、Ⅳ組鼠胃內(nèi)均有少量H.pylori存在。用藥25 d后，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的胃內(nèi)H.pylori清除率分別為80％、60％、60％。灌服和注射抗H.pylori卵黃抗體，

6、可以抑制沙土鼠胃內(nèi)H.pylori感染，其抑制效果與抗菌素相似。在成功研制出抗H.pylori卵黃抗體的基礎(chǔ)上，利用蒙古沙土鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，觀察抗H.pylori卵黃抗體對(duì)H.pylori感染的防制作用。實(shí)驗(yàn)鼠分為四組(36只/組)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別灌服生理鹽水、復(fù)合抗菌素和抗H.pylori卵黃抗體，連續(xù)14 d。Ⅳ組皮下注射抗H.pylori卵黃抗體，1次/天，每間隔48h后注射1次，連續(xù)預(yù)防兩周。在首次用藥后第8d口服接種幽門螺桿