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1、 本研究首先利用由oligo6.0,NCBIBlast和PrimerPremier5軟件去設(shè)計(jì)和篩選全EBV基因組cDNA探針,我們將這些探針的長(zhǎng)度限定在300-600mer。然后,通過(guò)PCR和RT-PCR方法從B95-8細(xì)胞和NPC組織的基因組DNA和RNA中擴(kuò)增這些探針,接著克隆入T/A克隆載體和測(cè)序鑒定。探針通過(guò)一對(duì)設(shè)計(jì)于載體多克隆兩端的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。產(chǎn)物純化后,探針被打印在Corning玻片上。通過(guò)與Cy3標(biāo)記的B9
2、5-8細(xì)胞cDNA進(jìn)行雜交反應(yīng),B95-8細(xì)胞內(nèi)EBV基因表達(dá)被檢測(cè)。隨后,基因芯片結(jié)果采用了兩種方法分別進(jìn)行了驗(yàn)證。 進(jìn)一步利用3組基因芯片數(shù)據(jù),從腫瘤的血管生成、細(xì)胞的黏附、蛋白激酶、NEM1轉(zhuǎn)移抑制基因等方面去研究鼻咽癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制,以及篩選與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因。HGF、BPAG1、VLA-2、CTSD、MMP1等基因能作為血管生成、黏附分子及其受體、蛋白激酶的代表基因,正向調(diào)控鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。而COL18A1、NEM1
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