丙酮醛與乙二醛酶Ⅰ對(duì)乳腺癌細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)功能的影響及其機(jī)制.pdf

1、目 錄中英文縮略詞對(duì)照表???????????????????l中文摘要????????????????????????2英文摘要????????????????????????4前 言????????????????????????6材料與方法???????????????????????8實(shí)驗(yàn)結(jié)果????????????????????????2 4分析與討論???????????????????????3 5結(jié)子各????????

2、????????????????3 7參考文獻(xiàn)????????????????????????3 8附 錄????????????????????????4 3致 謝????????????????????????4 4綜述及參考文獻(xiàn)?????????????????????4 5獨(dú)創(chuàng)性聲明???????????????????????5 5溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文丙酮醛與乙二醛酶I 對(duì)乳腺癌細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)功能的影響及其機(jī)制中文摘要目的

3、丙酮醛( M e t h y l g l y o x a l ，M G ) 是由糖酵解產(chǎn)生的二羰基復(fù)合物，初步研究表明M G 起著重要的抗腫瘤作用。乙二醛酶系統(tǒng)是M G 降解的主要酶，由乙二醛酶I ( G l y o x a l a s eI ，G L O D 和( G i y o x a l a s e1 I ，G L O I I ) 組成。在一些腫瘤中G L O I 的表達(dá)是上調(diào)的。本研究主要研究了M G 與G L O I 干擾在乳

4、腺癌細(xì)胞株中的生物學(xué)影響以及其潛在的機(jī)制。方法1 ．構(gòu)建低表達(dá)G L O I 的穩(wěn)定細(xì)胞株運(yùn)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方式將質(zhì)粒s h G L O I 以及s h N C 轉(zhuǎn)染乳腺癌M C F ．7 細(xì)胞、M D A - M B ．2 3 1 細(xì)胞、T 4 7 D 細(xì)胞。R e a l ．t i m e P C R 、W e s t e r n b l o t 技術(shù)檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞中G L O I m R N A 、G L O I 蛋白的表達(dá)變化，以

5、及酶活性分析檢測(cè)G L O I 酶活性的變化。2 ．在穩(wěn)定低表達(dá)細(xì)胞模型的基礎(chǔ)上進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)在M D A —M B - 2 3 1 細(xì)胞、M C F ．7 細(xì)胞以及T 4 7 D 細(xì)胞中和低表達(dá)G L O I 的M D A - M B ．2 3 I 細(xì)胞、M C F ．7 細(xì)胞以及T 4 7 D 細(xì)胞中加入M G 后，運(yùn)用c c k - 8 檢測(cè)其細(xì)胞活性變化，t r a n s w e l l 小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力的變化，劃

6、痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力，平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的克隆形成能力，管狀形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其形成管狀物的能力。3 ．在穩(wěn)定低表達(dá)細(xì)胞模型的基礎(chǔ)上進(jìn)行機(jī)制研究在M D A ．M B ．2 3 1 細(xì)胞與M C F ．7 細(xì)胞中和低表達(dá)G L O I 的M D A - M B ．2 3 l 細(xì)胞與M C F - 7 細(xì)胞中加入M G 后檢測(cè)其M A P K 家族成員p 3 8 、J N K 與E R K 家族的蛋白表達(dá)情況。同時(shí)檢測(cè)單獨(dú)和聯(lián)合作用后抗凋