香菇多糖硫酸酯的制備純化、鑒定及生物學活性的研究.pdf

1、香菇多糖具有提高免疫能力、抗病毒、抗腫瘤等生物學活性，在臨床上得到廣泛的應用。近年來香菇多糖硫酸酯由于具有良好的抗病毒作用，從而受到人們的關(guān)注。目前，對香菇多糖硫酸酯的研究主要集中于其抗病毒活性，而對其抗腫瘤作用未見詳細報道。 本實驗主要對硫酸酯化、理化性質(zhì)及生物學活性三部分內(nèi)容進行了研究。在酯化工藝方面對氯磺酸—吡啶法加以改進，采用逐步升溫的條件合成香菇多糖硫酸酯。實驗結(jié)果顯示，吡啶和氯磺酸比例6:1，反應溫度在65～90℃，

2、反應時間為1.5～2h，得到了取代度較高的衍生物；以離子交換DEAE-52柱層析，分子篩SephadexG-75、SephadexG-100柱層析對產(chǎn)物進行了分離純化，得到分子量不同的兩個組分LNTS1和LNTS2；由于LNTS1含量極高且水溶性好，我們選取其進行分離純化及進行進一步研究。通過離心凍融及瓊脂糖凝膠電泳鑒定了樣品LNTS1的純度，通過紫外光譜學和紅外光譜學分析及硫酸鋇比濁法，對產(chǎn)物進行硫酸基鑒定和結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果顯示，經(jīng)過硫

3、酸化，香菇多糖帶上硫酸基團，取代度為0.86；由于酯化的影響，香菇多糖改變了構(gòu)象及溶解度等理化性質(zhì)。通過高效凝膠示差色譜測定，我們得到的香菇多糖硫酸酯的重均分子量為8.2678萬，分子量分布寬度為1.5855；經(jīng)過硫酸化，香菇多糖的分子量分布變窄，分子量較為均一和集中。在生物學活性方面，檢測了香菇多糖和硫酸酯清除超氧陰離子、羥自由基的活性，并研究了其對體外培養(yǎng)的人宮頸癌細胞HeLa、人白血病細胞U937、人白血病細胞K562和人肝癌細胞