加溫聯(lián)合冬凌草甲素對(duì)肝癌細(xì)胞株SMMC-7721作用的研究.pdf

1、目的:探討加溫聯(lián)合冬凌草甲素是否具有協(xié)同抗肝癌作用,以及二者聯(lián)合的最佳作用模式,進(jìn)一步研究其可能的相關(guān)作用機(jī)制;為臨床熱化療治療肝癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:(1)采用四甲基偶氮唑藍(lán)還原法(MTT)檢測(cè)加溫和冬凌草甲素單用及合用時(shí)對(duì)體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721生長(zhǎng)的抑制作用,并且評(píng)判加溫與冬凌草甲素聯(lián)用有否協(xié)同作用;(2)采用吉姆薩染色、光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;(3)采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;(4)采

2、用免疫酶聯(lián)吸附法(ELISA)定量檢測(cè)肝癌細(xì)胞培養(yǎng)液中AFP;(5)全自動(dòng)生化儀檢測(cè)培養(yǎng)液中ALB、ALP的變化。
　　結(jié)果:(1)加溫和冬凌草甲素單用及合用時(shí)均能明顯抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng),與溫度、濃度及時(shí)間呈依賴關(guān)系;二者聯(lián)合對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制作用明顯強(qiáng)于單獨(dú)應(yīng)用(p<0.001),并且二者不同的聯(lián)合模式與作用大小之間有顯著差異(p<0.05),作用大小次序依次為:同時(shí)熱化療>先熱后化>先化后熱(p<0.05);同時(shí)熱化療能產(chǎn)生協(xié)同作

3、用,而其他兩種模式僅能產(chǎn)生相加作用。(2)加溫與冬凌草甲素均能引起肝癌細(xì)胞凋亡,隨溫度升高及藥物作用濃度加大,細(xì)胞凋亡率升高;二者聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率明顯高于單獨(dú)作用組。(3)加溫及冬凌草甲素單、合用均能明顯降低細(xì)胞培養(yǎng)液中AFP值(p<0.01),并且二者聯(lián)合作用強(qiáng)度大于單獨(dú)應(yīng)用組(p<0.01);但是,加溫和冬凌草甲素單、合用對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)液中ALB及ALP無(wú)明顯影響(p>0.05)。
　　結(jié)論:(1)加溫和冬凌草甲素具有明顯抑制肝癌