殘粒脂蛋白激活過氧化物酶體增殖物激活受體γ誘導(dǎo)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化.pdf

1、背景：
　　 高甘油三酯血癥與肥胖密切相關(guān)。肥胖患者血漿中殘粒脂蛋白(Remnant-like particles,RLPs)顯著增多。殘粒脂蛋白可誘導(dǎo)大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)分化為脂肪細(xì)胞。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)是成脂分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄

2、調(diào)節(jié)因子之一，能夠上調(diào)脂聯(lián)素等脂肪因子的表達(dá)。推測殘粒脂蛋白可通過激活PPARγ誘導(dǎo)人ADSCs的成脂分化。
　　 目的：
　　 觀察殘粒脂蛋白對人ADSCs成脂分化以及PPARγ和脂聯(lián)素表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 膠原酶消化法分離人ADSCs，DMEM/F12培養(yǎng)基進(jìn)行體外培養(yǎng)。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型。標(biāo)準(zhǔn)誘導(dǎo)劑（含胰島素、地塞米松、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤）刺激ADSCs后，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)

3、的變化，油紅O染色鑒定脂肪細(xì)胞。以單純10μg/mL胰島素刺激ADSCs為對照組，以不同濃度的殘粒脂蛋白(50、100、150、200μg/mL)與10μg/mL胰島素刺激ADSCs，油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴形成情況，RT-PCR檢測PPARγ和脂聯(lián)素的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 梭形ADSCs在體外呈成纖維細(xì)胞樣生長，傳代后可以穩(wěn)定地分裂增殖。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原CD105的表達(dá)率為53.43±2.24％，CD3

4、1、CD34、KDR表達(dá)均不足10％，分別為8.71±0.57％、4.39±0.94％、1.89±0.05％。在給予標(biāo)準(zhǔn)誘導(dǎo)劑刺激后，ADSCs胞體變大、變圓，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)脂滴，油紅O染色證明其分化為成熟的脂肪細(xì)胞。殘粒脂蛋白孵育ADSCs12天后，油紅O染色發(fā)現(xiàn)對照組及50μg/mL殘粒脂蛋白組有微量脂滴形成。隨著殘粒脂蛋白濃度的增加，100～200μg/mL殘粒脂蛋白組的紅色脂滴逐漸增加，以200μg/mL殘粒脂蛋白組的紅色脂滴最多。