單雙倍體酵母細(xì)胞對(duì)乙醇響應(yīng)的比較脂組學(xué)研究.pdf

1、本文選用釀酒酵母為模型，分別考察二倍體酵母拆孢體系中單倍體α型、單倍體a型和二倍體α/a型釀酒酵母細(xì)胞在發(fā)酵過(guò)程中對(duì)不同乙醇濃度的響應(yīng)情況。應(yīng)用LC-ESI-MSn和GC-TOF-MS高通量檢測(cè)手段分別對(duì)酵母細(xì)胞的磷脂和固醇分子進(jìn)行定性定量研究，初步建立釀酒酵母細(xì)胞的磷脂分子圖庫(kù)，從脂質(zhì)組學(xué)角度系統(tǒng)分析0％、3％、7％起始乙醇濃度下的上述三種細(xì)胞的磷脂和固醇分子組成的變化，采用主成分分析法(PCA)和分層聚類分析法(HCA)對(duì)不同體系的

2、磷脂分子進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析，尋找潛在的脂生物標(biāo)志物/群。
　　 發(fā)酵動(dòng)力學(xué)研究表明：二倍體α/a型酵母和單倍體α型酵母的生長(zhǎng)速率、葡萄糖消耗速率相近，而單倍體a型酵母明顯比上述兩種類型的酵母的耗糖速率減緩，生長(zhǎng)滯后1h。脂組學(xué)手段檢測(cè)到130種磷脂分子和4種固醇，并對(duì)117種磷脂分子進(jìn)行了定量分析。結(jié)果表明：酵母細(xì)胞中含有C18和C16的中長(zhǎng)碳鏈的不飽和磷脂比例升高，說(shuō)明酵母細(xì)胞通過(guò)增加合成長(zhǎng)鏈脂肪酸，提高不飽和磷脂比例來(lái)增加對(duì)乙

3、醇的耐受性和適應(yīng)性。推測(cè)PC含量增加而PA含量減少的原因可能是由于磷脂酶D(PLD)受到乙醇的抑制，活性降低，導(dǎo)致了PC分子的積累和PA分子的減少。
　　 PCA統(tǒng)計(jì)分析顯示：不同乙醇濃度和酵母細(xì)胞類型影響酵母磷脂代謝并表現(xiàn)出明顯的代謝差異。六大類磷脂中PS、PC、PE、PI的變化尤為明顯，推斷PS34：1、PS34：2、PC32：1、PC32：0、PC32：2、PC34：1、PC34：2、PE32：1、PE32：2、PE34：

4、3、PE34：1、PE34：2、PI26：0、PI26：1、PI32：1、PI32：2、PI34：0、PI34：1、PI34：2、PI36：0，可能是四類重要的脂生物標(biāo)志物(群)，在對(duì)乙醇的耐受機(jī)制上起關(guān)鍵作用，可以提高細(xì)胞對(duì)乙醇的耐受性和適應(yīng)性。分層聚類結(jié)果表明：較低的乙醇濃度下，細(xì)胞的磷脂代謝差異主要受不同細(xì)胞類型的影響；而當(dāng)乙醇濃度較高時(shí)，乙醇作為主要因素影響細(xì)胞磷脂代謝。二倍體α/a型酵母細(xì)胞與單倍體α型酵母細(xì)胞對(duì)乙醇響應(yīng)的磷脂