釀酒酵母響應(yīng)短期乙醇協(xié)迫的應(yīng)激機(jī)制的代謝組學(xué)研究.pdf

1、自工業(yè)革命以后，人類商品種類迅速豐富，從而對(duì)能源的需求量迅速增長(zhǎng)。尋找可再生的清潔能源，是目前發(fā)展?fàn)顩r下的一件非常重要的事。利用酵母發(fā)酵產(chǎn)乙醇是一個(gè)較為經(jīng)濟(jì)而且環(huán)保的生產(chǎn)可再生能源的方式;但還是存在一定的局限性。隨著發(fā)酵過程中乙醇的累積，釀酒酵母受到的毒害也越來越嚴(yán)重，漸漸地，細(xì)胞本身及其各細(xì)胞器形態(tài)和功能都會(huì)發(fā)生變化，當(dāng)乙醇濃度累積到一定程度的時(shí)候，超過酵母的耐受極限，酵母就會(huì)死亡。所以，了解釀酒酵母響應(yīng)乙醇脅迫的應(yīng)激機(jī)制尤為重要。<

2、br>　　 首先，本文從釀酒酵母的生理情況入手，測(cè)得其生長(zhǎng)的階段，再利用化學(xué)法監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基中累積到的乙醇含量。二者結(jié)合，選擇進(jìn)行乙醇脅迫的時(shí)間點(diǎn)，用不同濃度的乙醇(0％、3％、6％、9％、12％、15％)浸泡脅迫酵母細(xì)胞，測(cè)定其受到脅迫之后的衰以及細(xì)胞大小。發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)用菌種穩(wěn)定期很長(zhǎng)，并伴有緩慢的二次生長(zhǎng)，幾乎看不到衰亡期。確定脅迫時(shí)間為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中的8小時(shí)。發(fā)現(xiàn)死亡率不是隨著乙醇濃度的增大而線性增長(zhǎng)，而是在達(dá)到一定濃度之后突然增加。隨著

3、乙醇濃度的升高，經(jīng)過脅迫后的細(xì)胞大小也逐漸發(fā)生變化，越來越小。
　　 其次，利用基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的代謝組分析平臺(tái)，分析不同濃度脅迫后的胞內(nèi)代謝物。利用主成分分析( PCA，principal component analysis)和偏最小二乘法(PLS，partial least squares)提取六組代謝物中的差異成分鑒定出了22種差異代謝物。
　　 最后，利用聚類分析衡量不同數(shù)據(jù)源間的相似性，用代謝的差異表達(dá)