生長抑素衍生物誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡機制的研究.pdf

1、第一部分 奧曲肽對人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞凋亡與增殖抑制率的影響 目的:探討奧曲肽對人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞凋亡與增殖抑制率的影響,為臨床應(yīng)用生長抑素治療胰腺癌提供一定的實驗依據(jù).材料與方法:1.在人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞生長至對數(shù)期后,加入不同濃度奧曲肽(0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/ml),48小后采用MTT法檢測不同濃度奧曲肽(0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/ml)對PC

2、-3細(xì)胞增殖抑制率的影響.2.采用流式細(xì)胞術(shù)PI染色法觀測不同濃度奧曲肽(0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80μg/ml)對PC-3細(xì)胞凋亡的影響.第二部分 奧曲肽對胰腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染SST2R基因后的影響 目的:通過脂質(zhì)體介導(dǎo),將SST2R基因轉(zhuǎn)染人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞;然后探討其對陽性表達(dá)SST2R PC-3細(xì)胞增殖抑制和凋亡的影響.方法:1.采用脂質(zhì)體將SST2R基因轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)和we

3、stern-blot學(xué)法檢測胰腺癌細(xì)胞株SST2R的表達(dá).2.MTT比色法及流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度奧曲肽對SST2R基因轉(zhuǎn)染PC-3細(xì)胞前后增殖抑制率與凋亡的影響.第三部分 奧曲肽對轉(zhuǎn)染SST2R基因胰腺癌細(xì)胞survivin表達(dá)的影響 目的:轉(zhuǎn)染SST2R基因至人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞,探討奧曲肽對轉(zhuǎn)染SST2R基因前后PC-3細(xì)胞凋亡抑制蛋白(survivin)表達(dá)量的影響.方法:1.采用脂質(zhì)體將SST2R基因轉(zhuǎn)染入胰腺癌細(xì)胞株P(guān)

4、C-3細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測胰腺癌細(xì)胞SST2R的表達(dá).2.不同濃度(0.10,0.20,0.40,0.80μg/ml)奧曲肽對轉(zhuǎn)染SST2R基因PC-3細(xì)胞作用48小時后,RT-PCR法半定量和免疫細(xì)胞化學(xué)檢測PC-3細(xì)胞surviyin的表達(dá).第四部分 奧曲肽對大鼠胰腺癌組織SSTR和SST2R mRNA表達(dá)的影響 目的:研究SD大鼠胰腺癌在外源性生長抑素衍生物奧曲肽作用下,SSTR和SST2R mRNA表達(dá)量的變化,探討奧曲肽對