豬卵巢發(fā)育的組織學(xué)觀察及磷酸二酯酶3A的表達(dá)研究.pdf

1、卵泡發(fā)育是一個(gè)以形態(tài)變化為特征的生長(zhǎng)過(guò)程，同時(shí)伴隨著卵泡功能的分化.原始卵泡一旦啟動(dòng)生長(zhǎng)，便是一個(gè)連續(xù)不斷的發(fā)育和分化過(guò)程，要么變成優(yōu)勢(shì)卵泡，使卵子排放與成熟，要么中途閉鎖。每個(gè)性周期啟動(dòng)生長(zhǎng)一組原始卵泡，同時(shí)生長(zhǎng)啟動(dòng)的多數(shù)卵泡將不會(huì)達(dá)到排卵階段，而是在發(fā)育過(guò)程中的不同時(shí)期發(fā)生凋亡。卵泡發(fā)育過(guò)程的調(diào)節(jié)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，包括內(nèi)分泌因素（促性腺激素）和卵巢內(nèi)調(diào)節(jié)因子（性激素、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子），他們共同調(diào)控卵母細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育.
　　

2、 PDE3A是卵巢內(nèi)表達(dá)的主要磷酸二酯酶亞型，其在卵巢發(fā)育生長(zhǎng)過(guò)程中能降解cAMP，使cAMP濃度下降，從而下調(diào)FSH、LH濃度，達(dá)到維持細(xì)胞正常功能的作用。此外，PDE3A基因敲除小鼠排出的卵母細(xì)胞在體外不能自發(fā)減數(shù)分裂成熟，一直處于GV期，除非抑制PKA活性，卵母細(xì)胞才能繼續(xù)發(fā)育成熟.說(shuō)明在小鼠卵母細(xì)胞中PDE3A通過(guò)調(diào)控cAMP水平影響PKA活性，從而對(duì)調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞成熟起重要作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為二花臉母豬

3、，二花臉豬是我國(guó)優(yōu)良地方豬種，屬太湖豬中的優(yōu)秀種群，它以高繁殖性能而著稱于世，譽(yù)之為“豬中之國(guó)寶”、“世界豬種產(chǎn)仔之王”.經(jīng)國(guó)營(yíng)常熟畜禽良種場(chǎng)純繁的二花臉豬平均窩產(chǎn)總仔數(shù)和成活仔數(shù)分別達(dá)15.93和14.12頭；初情日齡和個(gè)體重分別為64天和15千克；子一代雜交母豬繁殖性能的雜交優(yōu)勢(shì)特別顯著，同時(shí)耐粗飼、適應(yīng)性強(qiáng)、肉質(zhì)鮮美.故選用二花臉母豬作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物具有一定的代表意義。
　　 本研究取用不同日齡的豬卵巢，通過(guò)染色觀察不同發(fā)育階

4、段的豬卵巢在組織學(xué)上的變化過(guò)程，旨在探討豬卵巢卵泡發(fā)育的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)；并通過(guò)測(cè)定PDE3A亞型在不同日齡的母豬卵巢組織中的表達(dá)，研究PDE3A在調(diào)控卵泡發(fā)育及成熟過(guò)程中的特殊意義，為提高產(chǎn)仔率提供理論基礎(chǔ)，從而提高畜群的繁衍速度，增加畜牧業(yè)生產(chǎn)的效益。
　　 為了研究母豬卵巢在不同發(fā)育階段的組織學(xué)變化規(guī)律和探討磷酸二酯酶3A(PDE3A)在卵巢發(fā)生發(fā)育和成熟過(guò)程中的生物學(xué)意義，本研究選二花臉母豬胎90日齡、新生1日齡、生后20、

5、120和180日齡的母豬卵巢，進(jìn)行組織學(xué)觀察，并利用RT-PCR檢測(cè)PDE3AmRNA的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，胎90日齡主要由原始卵泡組成；出生1日齡、20日齡、120日齡階段發(fā)育明顯，180日齡卵巢內(nèi)觀察到的形態(tài)特點(diǎn)與120日齡相似。另外，豬卵巢不同日齡都有PDE3A mRNA和內(nèi)參基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)的表達(dá)。經(jīng)灰度值掃描，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，PDE3A mRNA相對(duì)含量差異有顯著性(P＜0.01)。各組間兩兩比較結(jié)果（