Hedgehog信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖與凋亡以及對(duì)CyclinD1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過Hedgehog（HH）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的抑制劑Cyclopamine作用于人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞，研究Hedgehog信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖與凋亡以及對(duì)CyclinD1表達(dá)的影響。 方法： 1.以MDA-MB-231細(xì)胞為研究對(duì)象，應(yīng)用Cyclopamine處理后，用MTT方法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性的改變； 2.用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期與凋亡的情況； 3.RT-

2、PCR檢測(cè)GLI1、CyclinD1的mRNA的變化； 4.用免疫細(xì)胞化學(xué)術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的CyclinD1蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果： 1.與對(duì)照組相比，Cyclopamine可顯著抑制MDA-MB-231細(xì)胞的生長(zhǎng)并呈時(shí)效-量效關(guān)系； 2.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MDA-MB-231細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)Cyclopamine能提高細(xì)胞周期G0/G1期的比例，48h后出現(xiàn)明顯的“亞G1”峰； 3.GLI1，CyclinD1