Hedgehog信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖與凋亡以及對CyclinD1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本實驗通過Hedgehog（HH）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的抑制劑Cyclopamine作用于人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞，研究Hedgehog信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖與凋亡以及對CyclinD1表達(dá)的影響。 方法： 1.以MDA-MB-231細(xì)胞為研究對象，應(yīng)用Cyclopamine處理后，用MTT方法檢測細(xì)胞增殖活性的改變； 2.用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期與凋亡的情況； 3.RT-

2、PCR檢測GLI1、CyclinD1的mRNA的變化； 4.用免疫細(xì)胞化學(xué)術(shù)檢測細(xì)胞中的CyclinD1蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果： 1.與對照組相比，Cyclopamine可顯著抑制MDA-MB-231細(xì)胞的生長并呈時效-量效關(guān)系； 2.流式細(xì)胞術(shù)檢測MDA-MB-231細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)Cyclopamine能提高細(xì)胞周期G0/G1期的比例，48h后出現(xiàn)明顯的“亞G1”峰； 3.GLI1，CyclinD1