納米刀消融動物肝臟的實驗研究.pdf

1、目的:
　　1、通過對小型豬肝臟實施納米刀消融，研究納米刀消融肝臟的安全性和有效性，評估納米刀消融應用于臨床的可行性。
　　2、通過影像學和病理學方法觀察納米刀消融區(qū)域的影像學和組織學變化，分析細胞凋亡特定的免疫組織學特點，探討不可逆電穿孔(IRE)的消融機制。
　　3、通過納米刀和氬氦刀消融肝臟的對照實驗，比較兩種消融方式的優(yōu)缺點及適用范圍，評估氬氦刀聯(lián)合納米刀消融的可行性。
　　材料和方法:
　　1、選

2、取10只健康的實驗用小型豬行CT引導下肝臟納米刀消融術。將其隨機分為五組，每組2只。消融參數(shù)設定為:電極探針19G/1.06mm，針尖電極暴露距離2.5cm，兩探針距離1.5cm，采用直流電，電壓1500-2000V/cm，共10組90個脈沖，脈沖寬度70微秒，每組間隔3.5s。消融部位分別位于肝實質和肝門部。五組實驗動物分別于消融術后1天、3天、7天、14天及28天行CT增強掃描和磁共振(MR)增強掃描，而后處死取出肝臟，分別進行HE

3、染色、Von Kossa染色、vWF染色和TUNEL檢測。在TUNEL檢測中采用凋亡指數(shù)(AI)對不同時期的消融區(qū)和非消融區(qū)進行雙因素方差分析，采用統(tǒng)計圖分析AI的變化趨勢。
　　2、選用4只實驗用小型豬，隨機分為兩組。在CT引導下對實驗動物的肝臟分別進行納米刀消融和氬氦刀冷凍消融。納米刀消融參數(shù)同上;氬氦刀消融采用超細冷凍探針(17G/1.47mm)單針穿刺，氬氣冷凍6min，氦氣熱融2min，應用2次凍-融循環(huán)，術中間斷掃描監(jiān)

4、測消融情況。術后對實驗動物行CT平掃及增強掃描，觀察不同消融區(qū)的特征及變化。第一組術后當天處死，第二組術后30天處死。取出肝臟后，固定、染色、包埋、切片，并行病理學分析，比較兩種消融區(qū)的組織學差異。
　　結果:
　　1、所有實驗動物均存活，術后24小時日?；顒拥纫话闱闆r均與術前無明顯差別。其中B組1只實驗動物處死時發(fā)現(xiàn)少量腹水，呈淡黃色清亮液體;余均未出現(xiàn)明顯出血、感染、器官損傷等嚴重并發(fā)癥。本組實驗共產生24個納米刀消融區(qū)

5、，其中16個位于肝實質、8個位于肝門部。通過增強CT、MRI，納米刀消融術后顯示為無強化的低密度或低信號區(qū);術后14天及28天消融邊界逐漸模糊，邊緣出現(xiàn)輕到中度強化。HE染色、Von Kossa染色和vWF染色顯示消融區(qū)細胞非熱效應死亡，消融邊界清晰，膽管與血管形態(tài)完整;TUNEL檢測消融區(qū)內死亡細胞染色呈陽性。納米刀消融區(qū)和非消融區(qū)的凋亡指數(shù)有明顯差異，消融區(qū)AI隨時間變化而變化:納米刀消融術后AI開始上升，術后3天達最高，約48.8

6、±13.9％，此后逐漸下降，術后28天與非消融區(qū)正常細胞差別無統(tǒng)計學意義。
　　2、所有實驗動物均順利完成納米刀及氬氦刀冷凍消融，均無嚴重并發(fā)癥。納米刀及氬氦刀對肝臟消融效果均良好。氬氦刀術后急性期肝細胞破壞完全，伴大量淤血，術后30天大量纖維組織增生。納米刀對消融區(qū)內的血管、膽管等結構無明顯損傷，消融區(qū)內死亡細胞逐漸被正常細胞替代。
　　結論:
　　1、納米刀消融小型豬肝臟是安全、有效的。CT及MRI能較好的顯示納米