CT-1和磷酸化STAT3在1型糖尿病大鼠心肌中的表達及氯沙坦鉀的保護作用.pdf

1、目的：通過觀察心肌營養(yǎng)素-l(CT-1)與磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(p-STAT3)在1型糖尿病大鼠心肌中的表達以及氯沙坦鉀的干預(yù)結(jié)果，探討CT-1和p-STAT3在糖尿病心肌病(DCM)中的作用，以及氯沙坦鉀對糖尿病心肌病的保護作用。
　　方法：54只清潔級雄性Wista大鼠(購于山西醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心)，體重190～230g，飼養(yǎng)一周后隨機分為正常對照組(NC組，n=18)；糖尿病組(DM組，n=18)；氯沙坦鉀干預(yù)組

2、(DM-L組，n=18)。各組大鼠均禁食12h，DM組和DM-L組大鼠用鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）造模，劑量按照60mg/kg左下腹腔內(nèi)注射，NC組注射同等劑量的枸椽酸緩沖液。糖尿病大鼠造模成功1周后，DM-L組給予氯沙坦鉀生理鹽水混懸液灌胃，劑量按照50mg/kg/d，NC組和DM組每天給予等體積生理鹽水灌胃。每2周測一次體重和血糖，于灌胃的4周、8周、12周每組各取6只大鼠處死，斷尾采血測血糖，麻醉后腔靜脈采

3、血，分離血清后測定胰島素。取出心臟稱全心重(HW)、左心室重量(LHW)后計算心重指數(shù)HWI(心重mg/體重g)和左心室重量指數(shù)LVMI(左心重mg/體重g)。光鏡下觀察心肌組織病理改變，免疫組化法測定心肌中CT-1和p-STAT3的蛋白表達,實時熒光定量PCR檢測CT-1mRNA表達。
　　結(jié)果：
　　1、同期與NC組比較，DM組和DM-L組大鼠血糖顯著增高(P<0.01)，胰島素水平明顯降低(P<0.01)；同期與DM組

4、比較，DM-L組大鼠的血糖和胰島素?zé)o明顯差異(P>0.05)。
　　2、同期與NC組比較，DM組和DM-L組大鼠HWI、LVMI均增加（P＞0.05）；同期與DM組比較，DM-L組大鼠的HWI、LVMI均降低（P＜0.05）。
　　3、HE染色結(jié)果：NC組大鼠心肌細胞排列整齊，無心肌細胞增大、變性、壞死等改變，細胞核大小均勻、居中，胞漿染色均勻，細胞間隙正常，隨著時間的延長無明顯的變化；DM組大鼠心肌4周可見細胞排列紊亂，心

5、肌細胞肥大，心肌纖維萎縮；8周可見心肌細胞增生肥大和不同程度的變性、壞死，細胞核大小不均勻，細胞漿淡染，心肌纖維斷裂，心肌間質(zhì)出現(xiàn)膠原纖維；12周上述病變進一步發(fā)展，心肌細胞變性、壞死范圍和程度增大，心肌纖維化更加明顯。DM-L組大鼠的心肌隨著時間的延長，較糖尿病組心肌細胞變性、壞死的程度和范圍明顯減輕。
　　4、免疫組化結(jié)果：同期與NC組比較，DM組和DM-L組大鼠心肌組織中CT-1、p-STAT3蛋白表達顯著增加(P<0.05

6、)，隨著時間的延長呈進行性上升的趨勢；同期與DM組比較，DM-L組大鼠心肌中CT-1和p-STAT3蛋白表達明顯降低(P<0.05)。
　　5、熒光定量RT-PCR結(jié)果：同期與NC組比較，DM組和DM-L組大鼠心肌中CT-1mRNA的相對表達明顯升高(P<0.05)，隨著時間的延長呈進行性上升的趨勢；同期與DM組比較，DM-L組CT-1mRNA的相對表達降低(P<0.05)。
　　6、相關(guān)分析結(jié)果：糖尿病大鼠心肌組織中CT-

7、1與p-STAT3蛋白表達呈正相關(guān)（r=0.963，P<0.01）；CT-1蛋白表達與心重指數(shù)呈正相關(guān)（r=0.737，P<0.01）,與左心室質(zhì)量指數(shù)呈正相關(guān)（r=0.812，P<0.01）；p-STAT3蛋白表達與心重指數(shù)呈正相關(guān)（r=0.648，P<0.01）、與左心室重量指數(shù)呈正相關(guān)（r=0.775，P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、STZ誘導(dǎo)的糖尿病心肌病大鼠造模成功。
　　2、糖尿病組大鼠心肌中的CT-