人膠質瘤細胞兩株亞系Mdm2與p53相關蛋白的異質性分析.pdf

1、　　目的：(1) 以Mdm2和p53為靶點探討人腦膠質瘤細胞SWO-38兩株亞系SWOZ1和SWOZ2異質性的蛋白質分子機制；(2) 探討免疫共沉淀技術在腫瘤異質性蛋白質分子機制研究中的可行性,為腫瘤異質性研究建立一種新的研究方法。
　　方法：(1) 采用免疫組織化學方法檢測人腦膠質瘤細胞SWO-38及其兩亞系SWOZ1、SWOZ2中Mdm2和p53蛋白質的表達部位及水平；(2) 采用Western blot法進一步檢測SWO-3

2、8及其兩亞株中Mdm2及p53蛋白質的表達水平；(3) 應用免疫共沉淀技術檢測兩亞系SWOZ1、SWOZ2中Mdm2和p53相關蛋白表達譜的差異。
　　結果：(1) Mdm2和p53于人腦膠質瘤細胞SWO-38及其兩亞系SWOZ1、SWOZ2的胞核中均呈陽性表達,且三者表達量相當；(2) 在SWO-38及其兩亞系中均檢測到Mdm2和p53蛋白質的表達,且表達量相當；(3) 在Mdm2免疫共沉淀物中,Mr 37000處有一蛋白條帶S

3、WOZ2明顯深染于SWOZ1；在p53的免疫共沉淀物電泳圖譜中,同樣可清楚的看到在Mr 39000和38000兩處蛋白條帶均SWOZ1深染于SWOZ2；而在Mr 37000處一蛋白條帶SWOZ2明顯深染于SWOZ1。
　　結論：(1) 人膠質瘤細胞兩亞系SWOZ1和SWOZ2中,在Mdm2傳導通路于Mr約37000處的某蛋白表達量明顯不同；p53傳導通路中Mr約39000、38000、37000的三個蛋白在兩亞株中表達量存在顯著差

4、異。此些差異蛋白可能對膠質瘤異質性的產生起重要作用,并可能是決定兩亞株細胞表現(xiàn)不同生物學行為的關鍵。(2) 在Mdm2和p53的免疫共沉淀物中,Mr 37000處的蛋白均為SWOZ2高表達于 SWOZ1,初步推斷兩者可能具有相似的分子量或結構,是Mdm2和p53相互調節(jié)的交叉點,此步尚需測序后進一步鑒定。(3) 用免疫共沉淀技術探討腫瘤異質性的蛋白質分子機制是一條很好的途徑；(4) SWOZ1和SWOZ2兩株細胞亞系可為進一步研究膠質瘤