間尼索地平胃內(nèi)滯留型緩釋片的研制.pdf

1、目的：間尼索地平(m-Nisoldipine，m-Nis)是河北醫(yī)科大學(xué)率先研制開(kāi)發(fā)的新型二氫吡啶類鈣拮抗劑，初步試驗(yàn)表明，其光穩(wěn)定性明顯優(yōu)于尼索地平等同類藥物，藥理作用與尼索地平相似。二者對(duì)心血管的作用相比，間尼索地平更有優(yōu)越性，對(duì)心臟的抑制較弱，副作用較小，降壓作用較迅速等，且毒性很小。間尼索地平在水中溶解度很小，幾乎不溶于水。因此有必要將其制成胃內(nèi)滯留漂緩釋片，以增加藥物吸收，穩(wěn)定血藥濃度，降低毒副反應(yīng)和提高生物利用度，為臨床研究

2、及應(yīng)用提供一種很有前景的緩釋劑型。 方法：在大量文獻(xiàn)資料和預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以不同比例的阻滯劑硬脂酸和致孔劑聚乙二醇-6000(PEG-6000)與Dip制成固體分散體(m-Nis-SD)，并采用差示掃描量熱法(DSC)驗(yàn)證固體分散體的形成。確定選用羥丙甲基纖維素(HPMC)為親水凝膠骨架材料，加入助漂劑十八醇，發(fā)泡劑碳酸鎂(MgCO3)，和Dip-SD以不同條件制備漂浮型緩釋片，考慮片劑漂浮性能的同時(shí)，進(jìn)行影響藥物釋放速率的單因

3、素考察，確定影響胃漂浮制劑中藥物釋放的主要因素為工藝因素(片劑硬度，干法和濕法，顆粒大小)和上述幾種處方因素。選取合適的制備工藝，以HPMC，聚乙二醇-6000，十八醇，碳酸鎂進(jìn)行四因素三水平的正交設(shè)計(jì)，綜合評(píng)價(jià)片劑釋放度和漂浮性能，通過(guò)極差分析，確定優(yōu)化處方組成。 間尼索地平胃漂浮型緩釋片的釋放度測(cè)定方法，根據(jù)2000版中國(guó)藥典溶出實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)籃法要求，以900m10.1mol·l-1。HCL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100r·min-1，

4、溫度37±0.5℃，分別在0.5，1，2，3，4，5，6，7，8，10，12h取樣5ml濾過(guò)，隨即補(bǔ)充等溫等體積的空白介質(zhì)，取續(xù)濾液，照分光光度法在237nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸收度A值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算藥物濃度，求得間尼索地平胃內(nèi)滯留漂浮型緩釋片的累計(jì)釋放百分率。同法考察自制間尼索地平普通片釋放度。以優(yōu)化處方制備三批胃漂浮片，進(jìn)行含量測(cè)定和溶出度試驗(yàn)，考察制備工藝穩(wěn)定性，并將溶出數(shù)據(jù)分別用Higuchi模型，零級(jí)方程和一級(jí)方程進(jìn)行擬合。將

5、自制的間尼索地平胃內(nèi)滯留型緩釋片(Dip-HBS)進(jìn)行高濕度、高溫和強(qiáng)光照射下的穩(wěn)定性考察，以及密封自然放置條件下分別于制備后一個(gè)月、兩個(gè)月、三個(gè)月和六個(gè)月時(shí)測(cè)定其漂浮性能和體外累計(jì)釋放百分率，考察其穩(wěn)定性。漂浮性能考察：于37±0.5℃的以0.2％十二烷基硫酸鈉的人工胃液中，分別采用攪拌槳轉(zhuǎn)速為50r·min-1及轉(zhuǎn)籃法轉(zhuǎn)速為100r·min-1，模擬胃的蠕動(dòng)，考察自制的間尼索地平胃內(nèi)漂浮緩釋片的形態(tài)變化，起漂時(shí)間和持漂時(shí)間。同時(shí)采用

6、自制的浮力測(cè)定儀對(duì)m-Nis-HBS體外漂浮力進(jìn)行測(cè)定，并同法考察間尼索地平普通片漂浮性能作對(duì)比。 胃內(nèi)滯留性試驗(yàn)：家兔口飼m-Nis-HBS和普通片后，分別于不同時(shí)間處死一只，解剖動(dòng)物胃腸道，觀察片劑所在部位及形態(tài)。 體內(nèi)釋藥特性的研究(以家兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)：12只分兩組(每組6只)研究m-Nis-HBS和對(duì)照普通速釋片的體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)過(guò)程，給藥后于不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)家兔耳緣靜脈取血樣，以桂利嗪為內(nèi)標(biāo)物經(jīng)過(guò)預(yù)處理后，采用簡(jiǎn)便、

7、快速、靈敏的反相高效液相色譜法，測(cè)定血漿中間尼索地平的濃度。測(cè)定結(jié)果用3P97藥代動(dòng)力學(xué)程序進(jìn)行處理，模擬藥時(shí)曲線，并計(jì)算各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。以Tmax、Cmax和AUC為指標(biāo)，綜合評(píng)價(jià)m-Nis-HBS和m-Nis普通片的相對(duì)生物利用度。同時(shí)以m-Nis-HBS不同時(shí)間的體內(nèi)吸收分?jǐn)?shù)Fa對(duì)其相應(yīng)時(shí)間的體外釋放百分率Fr進(jìn)行回歸，求回歸直線方程和相關(guān)系數(shù)，考察m-Nis-HBS的體內(nèi)吸收與體外釋放的相關(guān)性。 結(jié)果：通過(guò)DSC，證

8、明了m-Nis以非晶態(tài)分散于載體中，形成了固體分散體。單因素考察確定的制備工藝為：以75％乙醇為潤(rùn)濕劑，采用濕法制粒壓片法制備m-Nis-HBS片，確定了處方各主要因素用量的水平。通過(guò)L9(34)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)得到優(yōu)化處方為A2B2C1D1，HPMC45mg，硬脂酸-PEG-6000-m-Nis(20:10:5)SD 35mg，十八醇10mg，MgCO310mg，根據(jù)極差大小可知，各因素對(duì)藥物釋放性能和漂浮性能的影響程度為C>A>B>D。

9、制得的片劑表面光潔圓整，外觀較好，硬度為4～5kg。處方中HPMC遇水膨脹形成凝膠屏障，阻止內(nèi)部片心進(jìn)一步水化，可控制藥物釋放；硬脂酸和PEG6000作為載體制成固體分散體，可使間尼索地平均勻分散，調(diào)節(jié)藥物釋放。十八醇為助漂劑和輔助阻滯劑，MgCO3為發(fā)泡劑，均可顯著提高片劑漂浮性能。根據(jù)優(yōu)化處方制備了三批片劑，同一批6片取樣時(shí)間點(diǎn)具均一性，三批片劑藥物釋放具有重現(xiàn)性，說(shuō)明制備工藝穩(wěn)定。將本品釋放曲線分別用零級(jí)方程、Higuchi模型、

10、一級(jí)方程進(jìn)行擬合，回歸方程分別為： Ft=7.401t+15.33，r=0.9865Ft=31.54t1/2-13.09，r=0.9955 log(Fa-Ft)=-0.1033t+2.087，r=-0.9766說(shuō)明釋藥特性更符Higuchi模型，m-Nis-HBS片具有明顯的緩釋特征。釋放度數(shù)據(jù)以Peppas方程進(jìn)行擬合，釋放機(jī)制為藥物的擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用。高溫、高濕度、強(qiáng)光影響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：m-Nis-HBS片對(duì)三者均

11、不穩(wěn)定，但含量下降均在5％以下，且片劑在RH75％10d的吸濕增重小于5％，均符合藥典規(guī)定。以處方量80％、100％、120％的間尼索地平及相應(yīng)輔料進(jìn)行了回收率實(shí)驗(yàn)，回收率分別為：(99.32±0.57)％，(99.61±0.41)％，(99.91±0.28)％(n=3)。三批片劑含量測(cè)定結(jié)果為：(101.3±0.59)％，(99.59±0.66)％，(102.6±0.25)％(n=3)，且含量均勻度合格。漂浮性能考察結(jié)果：于37±0.

12、5℃的含0.2％十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液人工胃液中，在攪拌槳轉(zhuǎn)速為50r·min-1情況下及采用轉(zhuǎn)籃法(100rmin)，自制的m-Nis-HBS均在3min內(nèi)起漂且可持續(xù)漂浮12h以上。而間尼索地平普通片5min內(nèi)即全部崩散下沉。對(duì)m-Nis-HBS體外漂浮力進(jìn)行測(cè)定，凈浮力最高達(dá)210mg，2h～6h之間凈浮力近似為一平臺(tái)期，6h后凈浮力呈線性下降：f=31.36-0.1317t(6h≤t≤30h)，r=-0.9945。 通

13、過(guò)家兔在體的胃內(nèi)滯留性試驗(yàn)，表明m-Nis-HBS 6h以后仍在胃部，已脹大且片型完整，胃內(nèi)滯留時(shí)間明顯延長(zhǎng)。 根據(jù)家兔體內(nèi)m-Nis-HBS片和對(duì)照普通速釋片的體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)過(guò)程的研究結(jié)果，計(jì)算各項(xiàng)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。m-Nis-HBS和m-Nis藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分別為： Tlag：0.06636±0.1022，0±Oh； T1/2(Ke)：6.637±1.801，2.721±0.8492hT1/2(Ka)：1.610±0.3391

14、，0.6390±0.3003hTmax：6.380±0.7540，2.325±0.8179hCmax：79.67±23.42，119.7±26.55ng·ml-2AUC：1303±309.4，784.6±204.5(ng·ml-1)·hMRT：14.93±2.884，6.088±2.328h二者體內(nèi)過(guò)程均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)一室模型。各項(xiàng)參數(shù)經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)表明：延遲釋放時(shí)間Tlag和消除速度常數(shù)Ke沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)；消除半衰期T1

15、/2(Ke)，吸收半衰期T1/2(Ka)、峰濃度Cmax、達(dá)峰時(shí)間Tmax、藥-時(shí)曲線下面積AUC均有顯著性差異(p<0.05)，說(shuō)明m-Nis-HBS漂浮緩釋片在家兔體內(nèi)具有明顯的緩釋制劑特征。以Tmax、Cmax和AUC為指標(biāo)，綜合評(píng)價(jià)m-Nis-HBS和m-Nis普通片的相對(duì)生物利用度。以m-Nis-HBS不同時(shí)間的體外釋放百分率Fr對(duì)其體內(nèi)的吸收分?jǐn)?shù)Fa進(jìn)行回歸，得直線方程：Fa=0.9078Fr-7.999，r=0.9932，