口蹄疫病毒A-GDMM-CHA-2013株VP1 H-2d限制性CTL表位預(yù)測與鑒定.pdf

1、口蹄疫(Foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒引發(fā)的一種以感染偶蹄動(dòng)物為主的急性、烈性、熱性、高度接觸性傳染病。其傳播途徑多、傳播速度快、傳染性強(qiáng)、病原變異大、嚴(yán)重危害畜牧業(yè)的發(fā)展和國家的經(jīng)濟(jì)貿(mào)易。在我國，口蹄疫的防制主要依賴于以強(qiáng)制免疫為主的綜合免疫措施，但是目前使用的滅活疫苗有存在著許多缺憾，研究、開發(fā)安全、高效的新型疫苗是大勢所趨。而表位肽疫苗正是其中一個(gè)研究熱點(diǎn)。在口蹄疫病毒引發(fā)的免疫應(yīng)答中，細(xì)胞免

2、疫起著重要的作用，且結(jié)構(gòu)蛋白VP1上有口蹄疫病毒主要的表位。因此，研究能夠誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答的CTL表位，將加深對細(xì)胞介導(dǎo)的抗口蹄疫病毒免疫的了解，并為設(shè)計(jì)新型疫苗提供參考。
　　口蹄疫病毒A/GDMM/CHA/2013株是2013年廣東省茂名分離的豬源毒，其很可能是由境外傳入。因此，研究該毒株的細(xì)胞表位、發(fā)展相應(yīng)疫苗，可能可以抵御外來疫情的傳入。結(jié)構(gòu)蛋白VP1上有口蹄疫病毒的主要抗原表位位點(diǎn)。研究根據(jù)GenBank中A/GDMM/

3、CHA/2013株結(jié)構(gòu)蛋白ⅥP1的序列，先借助計(jì)算機(jī)預(yù)測軟件預(yù)測了A/GDMM/CHA/2013株VP1結(jié)構(gòu)蛋白上H-2d限制性CTL細(xì)胞抗原表位，遴選出10條9肽的候選表位進(jìn)行化學(xué)合成。然后用A/GDMM/CHA/2013活毒免疫小鼠，分離病毒特異性脾淋巴細(xì)胞，進(jìn)而將其與候選表位體外共培養(yǎng)，通過T細(xì)胞增殖試驗(yàn)、Mouse IFN-γ ELISPOT試驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)對候選表位進(jìn)行鑒定。研究結(jié)果表明，預(yù)測的10條候選肽段中僅有2條H-2D