中國(guó)漢族成年人TNF-α和IFN-γ基因多態(tài)性與免疫性血小板減少性紫癜的相關(guān)性研究.pdf

1、本文分三個(gè)部分進(jìn)行探討：
　　第一部分：中國(guó)漢族成年人TNF-α基因多態(tài)性與免疫性血小板減少性紫癜易感性的相關(guān)性分析
　　目的：探討中國(guó)漢族成年人原發(fā)性ITP患者的易感性與腫瘤壞死因子α（TNF-α）基因啟動(dòng)子區(qū)五個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)(-238、-308、-857、-863和-1031)的相關(guān)關(guān)系。
　　方法：收集215名成年原發(fā)性ITP患者和206名正常對(duì)照的外周血。用PCR-RFLP和PCR-SSP方法檢測(cè)TNF-α基

2、因啟動(dòng)子區(qū)五個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)的基因型。用基因計(jì)數(shù)法分析每個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)與原發(fā)性ITP的關(guān)系，用SHEsis軟件對(duì)五個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行單倍體型分析。
　　結(jié)果：TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)五個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)的基因型和等位基因在原發(fā)性ITP患者和正常對(duì)照中未發(fā)現(xiàn)顯著差別。但是，TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)單倍體型GGC(-238G、-308G和-857C位點(diǎn))與原發(fā)性ITP的低發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有顯著相關(guān)性。該單倍體型在患者和正常人中的頻率為85％和8

3、9.5％(P<0.05, OR=0.64,95％CI:0.42-0.97)。這一相關(guān)性也出現(xiàn)在男性患者組，而在女性患者組中并未發(fā)現(xiàn)這一相關(guān)性。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)首次報(bào)告了中國(guó)漢族成年人群中TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)單倍體型 GGC(-238G、-308G和-857C位點(diǎn))與原發(fā)性ITP的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在顯著相關(guān)關(guān)系。而未發(fā)現(xiàn)成人原發(fā)性ITP易感性與TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)-238、-308、-857、-863和-1031五個(gè)單基因多態(tài)性位點(diǎn)

4、的相關(guān)性。
　　第二部分：中國(guó)漢族成年人IFN-γ基因多態(tài)性與免疫性血小板減少性紫癜易感性的相關(guān)性分析
　　目的：基于原發(fā)性免疫性血小板減少性紫癜（ITP）急性期γ干擾素（IFN-γ）的表達(dá)異常升高，探討中國(guó)漢族成年人原發(fā)性ITP患者的易感性與IFN-γ基因第一內(nèi)含子+874位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性（SNP）的相關(guān)關(guān)系。
　　方法：收集82名成年原發(fā)性ITP患者和79名正常對(duì)照的外周血。用PCR-SSP方法檢測(cè)IFN-γ基因

5、+874多態(tài)性位點(diǎn)的基因型。用基因計(jì)數(shù)法計(jì)算分析該位點(diǎn)與原發(fā)性ITP的關(guān)系。
　　結(jié)果：IFN-γ基因+874位點(diǎn)的T等位基因和含有T的基因型（AT或者TT型）在患者組中的頻率均略高于對(duì)照組，對(duì)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)也有一定的促進(jìn)作用；A型等位基因和含有 A的基因型在患者組的頻率降低，但是經(jīng)過(guò)卡方檢驗(yàn)計(jì)算均未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：IFN-γ基因第一內(nèi)含子+874位點(diǎn)各型別與原發(fā)性ITP的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不存在顯著相關(guān)關(guān)系。<

6、br>　　第三部分：免疫性血小板減少性紫癜初診患者治療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞TNF-α、IFN-γ及相關(guān)基因的表達(dá)與臨床意義
　　目的：基于初診及治療后原發(fā)性ITP患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中TNF-α、IFN-γ、TIM-3、Gal-9、FOXP3和IL-17A的mRNA表達(dá)變化，研究原發(fā)性ITP發(fā)生的免疫機(jī)制和治療后免疫系統(tǒng)的變化情況。
　　方法:用SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)37例初診原發(fā)性ITP患者治療前后及2

7、0例健康正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）中TNF-α、IFN-γ、TIM-3、Gal-9、FOXP3和IL-17的mRNA表達(dá)情況，并通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析它們與原發(fā)性ITP診斷和治療之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：成人原發(fā)性ITP初診患者組與正常對(duì)照組相比外周血單個(gè)核細(xì)胞中IFN-γ（P<0.001）、TIM-3（P<0.05）、Gal-9(P<0.01)、IL-17A(P<0.001)的mRNA表達(dá)量顯著升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。成人原發(fā)性I

8、TP患者初診組和皮質(zhì)激素治療后緩解組外周血單個(gè)核細(xì)胞中IFN-γ(P<0.01)、TIM-3（P<0.05）、Gal-9(P<0.01)和FOXP3(P<0.001)的mRNA表達(dá)量出現(xiàn)了顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。緩解組IFN-γ、TIM-3、Gal-9和FOXP3的mRNA表達(dá)量和初診組相比明顯降低。
　　結(jié)論：IFN-γ、TIM-3、Gal-9、IL-17A和FOXP3的表達(dá)水平和成人原發(fā)性ITP的發(fā)生和治療密切相關(guān)。研究這些分子和相