副溶血弧菌耐藥譜及其對(duì)頭孢類藥物抗性分析.pdf

1、副溶血弧菌廣泛存在于近岸海水和魚(yú)類、貝類等海洋生物中，是全世界范圍內(nèi)引起食源性疾病最常見(jiàn)的致病菌之一。但隨著抗生素的大量使用，該菌的耐藥性不斷增加，其耐藥機(jī)制主要與β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)，其中以超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）和AmpCβ-內(nèi)酰胺酶最具臨床意義，因此對(duì)其耐藥性方面研究具有重要意義。
　　本研究旨在分析不同來(lái)源地副溶血弧菌病人分離株間以及病人與食品分離株間的耐藥譜差異，檢測(cè)其產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的狀況，并確定該酶與菌株頭孢類抗生

2、素抗性之間以及菌株產(chǎn)毒力基因與產(chǎn)酶能力之間的關(guān)系。因此，針對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的177株副溶血弧菌分離株，其中127株病人分離株分別來(lái)自上海、寧波和舟山，50株食品分離株分別來(lái)自國(guó)內(nèi)和國(guó)外，主要進(jìn)行了以下三個(gè)方面的實(shí)驗(yàn)：
　　一、各地副溶血弧菌病人和食品分離株抗生素耐藥譜調(diào)查
　　本研究根據(jù)抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，選取了涵蓋治療腸桿菌科允許使用藥物所有種類，采用傳統(tǒng)紙片擴(kuò)散法調(diào)查177株副溶血弧菌分離株對(duì)18種抗生素的耐藥譜

3、。結(jié)果表明，副溶血弧菌病人分離株的主要耐藥譜比較相似，耐藥譜涉及12種抗生素，其中主要對(duì)阿莫西林/克拉維酸、頭孢噻吩、氨芐西林三種抗生素具有抗性。各地的耐藥嚴(yán)重程度為上海地區(qū)最高，舟山地區(qū)次之，寧波地區(qū)最低。相比病人分離株，食品分離株顯得耐藥譜更窄，耐藥菌株數(shù)量更少。
　　二、β-內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)和MIC值的測(cè)定
　　本研究根據(jù)耐藥表型結(jié)果，從177株菌株中選出能夠?qū)︻^孢唑林、頭孢噻吩、頭孢噻肟、頭孢他啶等產(chǎn)生耐藥及中介耐藥菌

4、株，共70株。通過(guò)紙片法和三維試驗(yàn)法對(duì)菌株是否產(chǎn)ESBLs和Amp-C酶進(jìn)行檢測(cè)，并針對(duì)這些菌株做了三代頭孢類抗生素的最小抑菌濃度值（MIC）測(cè)定。
　　結(jié)果表明，只有病人分離株能夠產(chǎn) ESBLs和AmpC酶，能產(chǎn)ESBLs酶的為12株，占總病人分離株數(shù)目約9.4％，能產(chǎn)AmpC酶的為6株，占總病人分離株數(shù)目約4.7%，同時(shí)能產(chǎn)該兩種酶的僅有兩株。相比病人分離株，研究中未發(fā)現(xiàn)存在食品分離株能夠產(chǎn) ESBLs或 AmpC酶。MIC值

5、表明產(chǎn)此類酶的菌株并不會(huì)對(duì)所有第三代頭孢類抗生素具有抗性，這也能夠說(shuō)明產(chǎn)酶菌株對(duì)于同代頭孢類抗生素的敏感程度是有區(qū)別的。
　　三、產(chǎn)酶菌株毒力基因檢測(cè)
　　為了研究副溶血弧菌產(chǎn)毒能力與產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶能力之間是否存在一定聯(lián)系，本研究將16株產(chǎn)酶菌株，分別做副溶血弧菌毒力基因tdh和trh特異性引物的PCR檢測(cè)。
　　結(jié)果表明，12株產(chǎn)ESBLs酶菌株中，10株來(lái)自金山，有9株產(chǎn)tdh毒素，0株產(chǎn)trh毒素。6株產(chǎn)AmpC