IL-22對SW982細胞增殖、凋亡及關節(jié)重塑相關基因表達影響的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗研究不同濃度IL-22對SW982細胞增殖、調(diào)亡及關節(jié)重塑相關基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)mRNA表達的影響。
　　方法:體外用含有10％FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)人滑膜細胞系SW982，再將細胞種入12孔板，待細胞貼壁后無血清處理24h，再次加入Nil(Control)和IL-22(0.1ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL)進行干預，用MTT

2、的方法檢測加入IL-22后12h、24h、48h和72h細胞活力的變化;在CFSE處理細胞后用流式細胞術檢測加入IL-22后0h、12h、24h、48h和72h細胞增殖的變化;加入IL-22干預48h后用Trizol法提取每組細胞RNA，并反轉(zhuǎn)錄為cNDA，再用real-timePCR技術檢測每組關節(jié)重塑相關基因OPG、MMP13、VEGF和IL-1β mRNA水平的變化;加入IL-22干預48h后用Annexin V-FITC和PI雙

3、染細胞在運用流式細胞術檢測細胞凋亡的變化;加入IL-22干預48h后用200μM(μmol/L)H2O2誘導SW982細胞凋亡24h，Annexin V-FITC和PI雙染流式細胞術檢測細胞凋亡的變化。應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，差異有顯著性標準為P＜0.01。
　　結果:(1)不同濃度IL-22在0-72h之間對SW982細胞活力沒有影響。(2)不同濃度IL-22在0-72h之間對SW982細胞增殖沒有影響。(3

4、)不同濃度IL-22(5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL)對SW982具有抗凋亡的作用。(4)濃度為10ng/mL的IL-22可使關節(jié)重塑相關基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)mRNA表達發(fā)生顯著的變化。(5)濃度為10ng/mL的IL-22對H2O2誘導SW982細胞的凋亡過程具有保護的抗凋亡作用。
　　結論:不同濃度IL-22在0-72h之間對SW982細胞活力及增殖沒有影響;5ng/m

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