IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡及分泌HB-EGF影響的研究.pdf

1、銀屑病是皮膚病中常見(jiàn)的易復(fù)發(fā)的由免疫細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎癥性皮膚病，在全球發(fā)病率約為2％-3％。主要的癥狀表現(xiàn)為表皮過(guò)度增殖、角化不全、真皮血管周?chē)罅棵庖呒?xì)胞浸潤(rùn)。銀屑病是角質(zhì)形成細(xì)胞和失調(diào)的免疫細(xì)胞共同作用的結(jié)果。目前認(rèn)為銀屑病的發(fā)病機(jī)制主要是由T細(xì)胞介導(dǎo)的以KC為靶點(diǎn)的免疫應(yīng)答反應(yīng)。Th22細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的T細(xì)胞亞群，其功能主要通過(guò)IL-22實(shí)現(xiàn)。有研究表明，在銀屑病病人中，血漿中IL-22和銀屑病的嚴(yán)重程度呈明顯的正相關(guān)。我們的前期研

2、究表明肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子樣生長(zhǎng)因子(heparin-bindingepidermal-growth-factor-like growth factor, HB-EGF)在銀屑病表皮KC異常增殖和其轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮重要作用。因此，我們推測(cè)Th22細(xì)胞及IL-22可能干擾KC分泌HB-EGF，進(jìn)而參與銀屑病表皮異常增殖的發(fā)生、發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)研究IL-22對(duì)HaCaT細(xì)胞功能和HaCaT細(xì)胞中HB-EGF表達(dá)的影響對(duì)揭示銀屑病表皮異常增殖的發(fā)病機(jī)制

3、具有重要意義。
　　目的:本文研究白介素22(Interleukin-22，IL-22)及IL-22 siRNA對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡及分泌HB-EGF的影響。
　　方法:以不同濃度(12.5μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L)IL-22和IL-22siRNA作用于HaCaT細(xì)胞，用MTT法檢測(cè)對(duì)細(xì)胞增殖的影響;用流式細(xì)胞術(shù)分析對(duì)細(xì)胞凋亡的影響;用免疫組化法、Western blot法、

4、ELISA法和實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)對(duì)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的影響。應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異有顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P＜0.05。
　　結(jié)果:1、IL-22促HaCaT細(xì)胞增殖作用的強(qiáng)度與其濃度有關(guān):不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞增殖率均高于對(duì)照組，當(dāng)IL-22濃度低于100μg/L時(shí)，其促HaCaT細(xì)胞增殖作用隨著濃度的升高而增強(qiáng)，但當(dāng)IL-22濃度高于100μg/L時(shí)其促H

5、aCaT細(xì)胞增殖作用減弱。IL-22 siRNA處理組細(xì)胞增殖率較對(duì)照組低。
　　2、IL-22抑制HaCaT細(xì)胞凋亡作用的強(qiáng)度與其濃度有關(guān):不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞早期凋亡率和晚期凋亡率均較對(duì)照組低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)IL-22濃度低于100μg/L時(shí)，其抑制HaCaT細(xì)胞凋亡作用隨著濃度的升高而增強(qiáng)，但當(dāng)IL-22濃度高于100μg/L時(shí)其抑制HaCaT細(xì)胞凋亡作用減弱。IL-22 siRNA處理組細(xì)胞早期和晚期凋亡

6、率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、IL-22促HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF的作用的強(qiáng)度與其濃度有關(guān):不同濃度IL-22處理組的細(xì)胞分泌HB-EGF的量均高于對(duì)照組，且隨著IL-22濃度的升高，其促HB-EGF分泌作用逐漸增強(qiáng)。IL-22 siRNA處理組HB-EGF分泌量較對(duì)照組低。
　　結(jié)論:IL-22可促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖并抑制其凋亡，且可促進(jìn)HaCaT細(xì)胞分泌HB-EGF。IL-22 siRNA可抑制Ha