GC-MS法同時檢測動物組織中多種性激素類獸藥殘留的研究.pdf

1、本文是國家技術(shù)監(jiān)督檢驗檢疫總局下達的科研項目,項目編號為20021K042。采用GC-MS技術(shù),對動物組織中的己烷雌酚、己烯雌酚、己二烯雌酚、還原尿睪酮、表睪酮、雌酮、雌二醇、炔雌醇、雌三醇九種性激素進行同時檢測。
　　 樣品以乙腈為提取溶劑,經(jīng)均質(zhì)、超聲、正己烷脫脂,依次通過C18、硅膠、氨基固相萃取柱凈化,為了增強GC-MS檢測激素類獸藥的靈敏度,用50μLBSTFA:TMCS(99:1)的硅烷化衍生試劑添加50μL吡啶進行

2、衍生化反應(yīng)。
　　 該論文采用家用微波爐對九種激素類獸藥進行輔助衍生反應(yīng)。在輸出功率為700W的條件下,考察不同反應(yīng)時間(15～120s)的微波效率,并與傳統(tǒng)水浴比較。實驗證明在輸出功率為700W的微波爐中,衍生化反應(yīng)60s,比傳統(tǒng)水浴中70℃反應(yīng)45min更具有優(yōu)勢。通過衍生反應(yīng)對不同濃度的標準物質(zhì)做線性方程,其線性范圍為0.0015～0.48μg/mL,R2在0.9961～0.9982范圍內(nèi)。結(jié)果顯示微波輔助衍生可以有效的促

3、進樣品中的性激素快速衍生,供GC-MS分析。
　　 GC-MS采用選擇離子模式,毛細管柱選用0.25mm×30m×0.25μm的DB-5MS,以高純He(99.999％以上)為載氣,流量1.0mL/min,壓力11.6psi(1psi=6.89kPa即79.9kPa),不分流進樣2μL,進樣口溫度、接口溫度均為280℃。程序升溫條件為:初始爐溫120℃,保持1min后以15℃/min的升溫速率上升到250℃保持6min,再以5℃

4、/min的升溫速率上升到280℃保持6min。四極桿溫度:150℃,EM電壓:1600V,溶劑延遲:10min,四極桿溫度:150℃。
　　 該實驗提供了對豬肉、牛肉及動物肝臟、腎臟的檢測方法,并采用外標法定量。動物組織中己烷雌酚、己烯雌酚、己二烯雌酚、還原尿睪酮、表睪酮、雌酮、雌二醇、炔雌醇、雌三醇的定性檢出限范圍為:0.1～1μg/kg,定量檢測限范圍為0.2～2μg/kg,均低于或等于歐盟殘留限量標準。所有九種激素的回收率