放射性受體分析法快速篩檢動物組織中β-內(nèi)酰胺類獸藥殘留.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目前β-內(nèi)酰胺類抗生素是最為廣泛使用的一類抗生素,同時β-內(nèi)酰胺類是牛奶和組織中檢出殘留報道最多的約物。長期以米,傳統(tǒng)的β-內(nèi)酰胺類獸藥殘留的初篩檢測多以杯碟法為主。但由于具備抑菌作用的抗生素種類繁多,且干擾因素較多。杯碟法檢測剛性后難以確定抗生素具體種類,容易出現(xiàn)誤判,假陽性率較高。而放射性受體分析法是一種對微生物受體進行標(biāo)記,其原理是將放射免疫測定(RIA)、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)、生物發(fā)光技術(shù)和化學(xué)發(fā)光技術(shù)相結(jié)合進行檢測的

2、新型檢測技術(shù)。本文就放射性受體分析法檢測β-內(nèi)酰胺類獸藥殘留的實驗方案進行了設(shè)計,并對各類參數(shù)進行了驗證。主要做了以下工作: 1.制定了完整、成熟、有效的放射性受體分析法快速篩檢動物組織中β-內(nèi)酰腋類獸約殘留檢測方案,并對實驗過程可能山現(xiàn)的影響因素進行了討論。 2.對包括提取液的選擇、pH的影響、孵育時間在內(nèi)等影響檢測的實驗條件進行選擇與確定,最終選擇pH 7.0的MSU 萃取緩沖溶液作為提取液,并將溫浴時間確定為2mi

3、n。 3.對檢測的選擇性利特異性進行驗證。分別選擇了青霉素G鉀、阿莫西林、氨芐西林、鄰氯青霉素、雙氯青霉素、頭孢噻呋進行交叉反應(yīng)試驗,實驗結(jié)果表明該測定方法對各β-內(nèi)酰胺類藥物具有良好的選擇性;用MSU緩沖溶液配制1000 μg/kg的恩諾沙星、新霉素、慶人霉素、鏈霉素、螺旋霉素、林可霉素、四環(huán)霉素、氯霉素、磺胺二甲基嘧啶、紅霉素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液對檢測方案的特異性進行驗證,6次檢驗結(jié)果cpm均明顯高于表3中β-內(nèi)酰胺類藥物的cpm

4、值,結(jié)果確定為陰性,實驗結(jié)果表明該方法對β-內(nèi)酰胺類藥物有良好的特異性。 4.對檢測方案的檢測限進行了研究。靈敏度實驗結(jié)果表明,當(dāng)藥物濃度增加到20βg/kg后,如果將藥物濃度繼續(xù)增人也無法對測定的cpm值產(chǎn)生明顯的改變;確定及驗證不同基質(zhì)中檢測限的結(jié)果表明,各種基質(zhì)中In(p)均與cpm值存在著良好的線性關(guān)系,豬肉、牛肉、雞肉、魚肉及蝦肉等基質(zhì)的檢測控制點分別為930、865、955、994和890。 5.對檢測的影響

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