放射性受體分析法快速篩檢動(dòng)物組織中β-內(nèi)酰胺類(lèi)獸藥殘留.pdf

1、目前β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素是最為廣泛使用的一類(lèi)抗生素，同時(shí)β-內(nèi)酰胺類(lèi)是牛奶和組織中檢出殘留報(bào)道最多的約物。長(zhǎng)期以米，傳統(tǒng)的β-內(nèi)酰胺類(lèi)獸藥殘留的初篩檢測(cè)多以杯碟法為主。但由于具備抑菌作用的抗生素種類(lèi)繁多，且干擾因素較多。杯碟法檢測(cè)剛性后難以確定抗生素具體種類(lèi)，容易出現(xiàn)誤判，假陽(yáng)性率較高。而放射性受體分析法是一種對(duì)微生物受體進(jìn)行標(biāo)記，其原理是將放射免疫測(cè)定(RIA)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)、生物發(fā)光技術(shù)和化學(xué)發(fā)光技術(shù)相結(jié)合進(jìn)行檢測(cè)的

2、新型檢測(cè)技術(shù)。本文就放射性受體分析法檢測(cè)β-內(nèi)酰胺類(lèi)獸藥殘留的實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行了設(shè)計(jì)，并對(duì)各類(lèi)參數(shù)進(jìn)行了驗(yàn)證。主要做了以下工作： 1．制定了完整、成熟、有效的放射性受體分析法快速篩檢動(dòng)物組織中β-內(nèi)酰腋類(lèi)獸約殘留檢測(cè)方案，并對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可能山現(xiàn)的影響因素進(jìn)行了討論。 2．對(duì)包括提取液的選擇、pH的影響、孵育時(shí)間在內(nèi)等影響檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行選擇與確定，最終選擇pH 7.0的MSU 萃取緩沖溶液作為提取液，并將溫浴時(shí)間確定為2mi

3、n。 3．對(duì)檢測(cè)的選擇性利特異性進(jìn)行驗(yàn)證。分別選擇了青霉素G鉀、阿莫西林、氨芐西林、鄰氯青霉素、雙氯青霉素、頭孢噻呋進(jìn)行交叉反應(yīng)試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該測(cè)定方法對(duì)各β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物具有良好的選擇性；用MSU緩沖溶液配制1000 μg/kg的恩諾沙星、新霉素、慶人霉素、鏈霉素、螺旋霉素、林可霉素、四環(huán)霉素、氯霉素、磺胺二甲基嘧啶、紅霉素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)檢測(cè)方案的特異性進(jìn)行驗(yàn)證，6次檢驗(yàn)結(jié)果cpm均明顯高于表3中β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的cpm

4、值，結(jié)果確定為陰性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物有良好的特異性。 4．對(duì)檢測(cè)方案的檢測(cè)限進(jìn)行了研究。靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)藥物濃度增加到20βg/kg后，如果將藥物濃度繼續(xù)增人也無(wú)法對(duì)測(cè)定的cpm值產(chǎn)生明顯的改變；確定及驗(yàn)證不同基質(zhì)中檢測(cè)限的結(jié)果表明，各種基質(zhì)中In(p)均與cpm值存在著良好的線(xiàn)性關(guān)系，豬肉、牛肉、雞肉、魚(yú)肉及蝦肉等基質(zhì)的檢測(cè)控制點(diǎn)分別為930、865、955、994和890。 5．對(duì)檢測(cè)的影響