膿毒癥大鼠模型中腦損傷的磁共振波譜變化研究.pdf

1、膿毒癥大鼠模型中腦損傷的磁共振波譜變化研究Studythecorrelationofmagneticresonancespectroscopychangeandbraininjuryintheratmodelofsepsis課題來(lái)源：自選學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專(zhuān)業(yè)名稱培養(yǎng)類(lèi)型培養(yǎng)層次所在學(xué)院溫妙云曾紅科教授急診醫(yī)學(xué)委培碩士第二臨床醫(yī)學(xué)年月日剞紅摘要術(shù)。其檢測(cè)與腦損傷有關(guān)的代謝化合物NAA、Cho、Cr分別代表神經(jīng)元的完整性、損傷恢復(fù)和能量代

2、謝。目前該技術(shù)已成熟應(yīng)用于創(chuàng)傷性腦損傷、缺血缺氧性腦病、顱內(nèi)感染等疾病的診斷和評(píng)估。目的：通過(guò)對(duì)膿毒癥大鼠模型腦部磁共振波譜研究，為膿毒癥引起腦損傷的早期診斷和評(píng)估探索一種較為可靠的無(wú)創(chuàng)性診斷技術(shù)。方法：將35只SD雄性大鼠隨機(jī)分為4組：對(duì)照組(n=5)、膿毒癥6h組(n=10)、膿毒癥12h組(n=10)、膿毒癥24h組(n=10)。實(shí)驗(yàn)組大鼠予LPS30mg／kg的劑量進(jìn)行腹腔注射建立膿毒癥模型；而正常對(duì)照組給予等量的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)

3、組分別在建模后對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)6h、12h、24h經(jīng)腹腔注射3％戊巴比妥鈉溶液(02mL／lOOg)進(jìn)行麻醉；對(duì)照組予注射生理鹽水后24h進(jìn)行同樣麻醉。待麻醉成功后將大鼠頭部固定在特制的有機(jī)玻璃立體定向儀的支架上，完成大鼠頭顱磁共振形態(tài)學(xué)成像和右側(cè)海馬波譜分析。所有成像在7T、30cm水平鉆孔的磁體中(德國(guó)BRUKER公司，型號(hào)：Biospec70／20USR)完成，同時(shí)使用G060梯度設(shè)置和全身多梯度38mm諧振器。磁共振檢查結(jié)束后，立即打

4、開(kāi)處于麻醉狀態(tài)大鼠的胸腔，暴露心臟。用注射器從心尖部插入左心室采集血液標(biāo)本后(4。C，3000rpm轉(zhuǎn)速離心10分鐘，分離出血清以05mlEP管分裝，70。C保存，為檢測(cè)NSE和SlOObeta血清蛋白濃度備用)，在右心耳處剪5口放血，先以150mLO9％氯化鈉溶液快速灌注，然后減慢灌注速度直至從右心耳處流出清亮的液體，再以溶于01mol／L磷酸鹽緩沖液(PBS)的4％多聚甲醛150mL繼續(xù)灌注固定1h。隨后打開(kāi)大鼠顱骨，取其腦組織固定

5、于4％多聚甲醛中備用(取右側(cè)腦組織，脫水，石蠟包埋，常規(guī)制備厚度為8um的切片，進(jìn)行HE、Nissl及TUNEL染色，于顯微鏡下觀察海馬組織的病理變化)。結(jié)果：35只SD雄性大鼠結(jié)果在對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)6h組死亡3只，存活7只(死亡率30％)；12h組死亡4只，存活6只(死亡率40％)；24h組死亡3只，存活7只(死亡率30％)。與對(duì)照組比較，膿毒癥組共20只存活大鼠全部出現(xiàn)精神萎靡不振、豎毛、嗜睡，眼鼻滲血、拉稀等膿毒癥表現(xiàn)，12h組和24h