附子主要二萜生物堿的分離和活性測(cè)試.pdf

1、本研究以分離具有殺蟲(chóng)活性的附子二萜生物堿化合物為目標(biāo)，采用優(yōu)化的工業(yè)化提取、分離純化方法體系，以獲得可大量制備的二萜生物堿化合物單體。研究確定了烏頭生物堿的優(yōu)化粗提工藝條件為3倍95％乙醇溶劑浸泡3次，提取率達(dá)96％。對(duì)工業(yè)化樹(shù)脂純化工藝進(jìn)行研究，篩選出了X—5、AB—8、D—101三種適合生物堿純化的樹(shù)脂，確定三種樹(shù)脂的最佳吸附和洗脫率，以及最佳上樣條件6g/L，pH4．5，18℃。確定了10％乙醇溶液和95％乙醇溶液洗脫烏頭總堿時(shí)的

2、不同特點(diǎn)。 在生物堿主要單體的分離純化中，確定了最佳的酸水提取條件，石油醚脫脂以及氯仿萃取的比例和次數(shù)，在最大限度的得到生物堿的同時(shí)使用最少數(shù)量的溶劑用量。確定適合的硅膠型號(hào)，通過(guò)硅膠柱層析和結(jié)晶操作，得到純度達(dá)到95％以上的中烏頭堿和附子靈分別為15．72g和7．89g，并且還得到了宋果靈單體0．72g。對(duì)于得到的單體進(jìn)行紫外，質(zhì)譜，NMR等鑒定，確定得到的化合物為中烏頭堿、附子靈、宋果靈。 在殺蟲(chóng)活性測(cè)試中，采用丙酮

3、、丙酮甲醇混合液和DMSO為溶劑，分別對(duì)附子乙醇提取物、總生物堿、中烏頭堿和附子靈進(jìn)行殺蟲(chóng)活性測(cè)試，對(duì)3齡黏蟲(chóng)24h校正死亡率最高為16．7％。確定了DMSO作為溶劑時(shí)，有最好觸殺效果。DMSO作為溶劑時(shí)，不同濃度中烏堿48h觸殺活性隨濃度增加而增加，在最大濃度1．25 mg/mL下，48h校正死亡率83％，毒力回歸曲線y=2．0044x+3．5908，R2=0．9485，LC50=0．504mg/mL。胃毒活性測(cè)定時(shí)，發(fā)現(xiàn)其對(duì)黏蟲(chóng)的胃