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文檔簡介
1、目的:研究Shh通路抑制劑cyclopamine對人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U87細(xì)胞增殖與細(xì)胞周期的影響及其分子生物學(xué)機(jī)制。
方法:以不同濃度的cyclopamine處理U87細(xì)胞在不同時(shí)間下,用四甲基偶氮唑鹽(MTT)分析法檢測各組U87細(xì)胞的增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測不同濃度cyclopamine對細(xì)胞周期的影響,Western blot檢測藥物作用前后細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白ERK1/2表達(dá)的變化。
結(jié)果:Cyclopami
2、ne處理組U87細(xì)胞形態(tài)學(xué)有所不同。MTT法檢測結(jié)果顯示,cyclopamine對U87細(xì)胞增殖的抑制有濃度依賴性和時(shí)間依賴性(P<0.05)。流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的增加,G0/G1期細(xì)胞百分比明顯增加(P<0.05),而S期細(xì)胞百分比明顯降低(P<0.05)。Western blot檢測結(jié)果顯示,隨著藥物濃度的增加,U87細(xì)胞中ERK1/2磷酸化水平逐漸降低。
結(jié)論:Shh信號通路的異常傳導(dǎo)可能與膠質(zhì)瘤的增殖、生長
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