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文檔簡介
1、目的:研究姜黃素(Curcumin)與放療單用或者聯(lián)用對 U87人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的生長抑制效果、U87細(xì)胞的形態(tài)學(xué)的變化、以及對于細(xì)胞周期分布和特異蛋白的影響。根據(jù)所得結(jié)果分析姜黃素在體外放療增敏作用,其劑量與效應(yīng)關(guān)系、時間與效應(yīng)關(guān)系、效應(yīng)分子變化特征等。
方法:不同濃度姜黃素作用于人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞24h后,改良MTT法(CCK-8)檢測姜黃素藥物毒性;姜黃素與放療單用和聯(lián)用后,通過克隆形成實驗(clone-forming
2、 assay)觀察姜黃素對 U87細(xì)胞放射敏感性的影響,采用 TUNEL法檢測各組膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡細(xì)胞;以流式細(xì)胞儀檢測各組膠質(zhì)瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期分布(細(xì)胞處于G1、S、G2的比率)。采用western blotting測定姜黃素對雙特異性磷酸酶-2(DUSP-2)、JNK及ERK等表達(dá)水平的影響。
結(jié)果:姜黃素對人膠質(zhì)瘤 U87細(xì)胞具有明顯的抑制作用,可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,其效應(yīng)呈現(xiàn)明顯的時間和劑量依賴。選擇對膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞影響較
3、小的劑量(5?mol/L、10?mol/L)即可顯著降低放射后 U87細(xì)胞的克隆形成率,其放射增敏比為1.71和4.65;流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),姜黃素可將U87細(xì)胞阻滯在放射敏感時相G2/M期。應(yīng)用western blotting測定發(fā)現(xiàn),姜黃素可引起DUSP-2的表達(dá)上調(diào),而抑制下游ERK和JNK的表達(dá)。
結(jié)論:低劑量的姜黃素對人膠質(zhì)瘤 U87細(xì)胞有放射增敏作用,其機(jī)制可能是,姜黃素引起DUSP-2表達(dá)水平提高,同時調(diào)控下游通
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