體外構建組織工程化口腔粘膜的實驗研究.pdf

1、目的:1.應用組織工程的方法,探討研制一種適合于臨床應用的組織工程化復合粘膜2.比較兩種生物支架材料PGA及Alloderm在構建口腔粘膜組織方面的優(yōu)劣方法:體外培養(yǎng)、擴增狗口腔粘膜上皮細胞,通過細胞形態(tài)學及角蛋白免疫組化染色等對細胞進行定性研究;通過測定細胞生長曲線及群體倍增時間,了解細胞生長基本規(guī)律及其增殖能力.將培養(yǎng)的狗口腔粘膜上皮細胞接種于AlloDerm上,構建組織工程化狗口腔粘膜,通過HE染色觀察組織形態(tài),免疫組化染色檢測p

2、63和Ki67;體外培養(yǎng)、擴增人口腔粘膜上皮細胞和成纖維細胞,通過細胞形態(tài)學及角蛋白、波形蛋白免疫組化染色等對細胞進行定性研究;通過測定細胞生長曲線及群體倍增時間了解細胞生長基本規(guī)律及其增殖能力.用MTT法檢測口腔粘膜上皮細胞及成纖維細胞在PGA上的增殖情況,研究其生物相容性.將培養(yǎng)的人口腔粘膜成纖維細胞接種于PGA上,培養(yǎng)7天后再接種上皮細胞于表面,體外形成活的粘膜樣組織.通過HE染色觀察組織形態(tài),用Masson染色觀察膠原分布和形態(tài)