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文檔簡介
1、目的:以內毒素(LPS)復制的急性肺損傷大鼠模型為研究對象,觀察特異性抑制劑DAPT阻斷Notch信號前后,Notch1在肺組織表達的變化情況,探討Notch信號通路在急性肺損傷(ALI)發(fā)病中的作用。
方法:選取健康、成年SD大鼠32只,SPF級,體重300g-500g,采用LPS氣管內滴入的方法構建急性肺損傷大鼠模型。將大鼠按隨機數(shù)字表法分為四組,每組雌雄各半,對照組:氣管內不滴入任何試劑;急性肺損傷組:氣管內滴入LPS稀
2、釋液;干預組:氣管內滴入LPS稀釋液1小時后,即刻給予DAPT稀釋液;溶劑組:氣管內滴入DMSO。4小時后放血處死大鼠,封閉氣管,分離肺臟,采集標本。觀察大鼠肺濕/干重(W/D)比值變化,肺組織病理及動脈血氣改變,用免疫組化方法檢測肺組織中Notch1表達情況。采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件,進行統(tǒng)計學分析,兩個獨立樣本間的均數(shù)比較采用t檢驗,多個獨立樣本間的均數(shù)比較采用單因素方差分析法,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。
結果:
3、1.肺臟的大體形態(tài):對照組色澤柔和,呈淡粉紅色,質地柔軟,邊界清楚,邊緣銳利,表面光滑,無出血點;急性肺損傷組色澤光亮,大部分呈灰白或紫紅色,質地較硬,邊界不清,邊緣圓鈍,存在廣泛出血點,部分融合成片,表面凹凸不平,干預組介于兩者之間,溶劑組與對照組大致相同。2.動脈血 PO2、PO2/FiO2及肺組織濕/干重(W/D)比值:急性肺損傷組PO2及 PO2/FiO2均顯著低于干預組(P<0.01)和對照組(P<0.01),溶劑組與對照組大
4、致同;與對照組比較,急性肺損傷組肺W/D比值顯著升高(P<0.01),干預組肺 W/D比值介于急性肺損傷組(P<0.01)和對照組(P<0.01)之間,溶劑組與對照組的肺W/D比值大致相同,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)。3.肺臟的組織形態(tài)學:急性肺損傷組肺泡廣泛融合,腔內存在大量的肺泡巨噬細胞和中性粒細胞,有透明膜形成,肺泡壁斷裂、薄厚不均,有炎性細胞侵潤,與對照組(P<0.01)比較,損傷明顯。干預組較急性肺損傷組損傷輕,無透明膜
5、形成(P<0.01),但較對照組有損傷,肺泡部分融合,腔內有或無炎性細胞,肺泡壁增厚( P<0.01)。溶劑組與對照組比較,損傷差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)。4. Notch1蛋白的表達:急性肺損傷組與對照組比較,Notch1蛋白的表達強度顯著增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。干預組目的蛋白Notch1的表達量較急性肺損傷組明顯下降(P<0.01),但較對照組有升高(P<0.01)。溶劑組和對照組比較,Notch1蛋白表達差異
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