核苷類似物治療慢性乙型肝炎病毒準種演變與臨床關系的研究.pdf

1、慢性乙型肝炎威脅全球人類健康，其中1/3以上的慢性感染者在中國。抗病毒治療是慢性乙型肝炎的核心治療措施。核苷類似物是目前抗病毒治療的主流藥物，隨著眾多新型核苷類似物的研發(fā)和逐漸上市，臨床用藥有了更多選擇。其中恩替卡韋(ETV)作為強效HBV抑制藥物已于近年上市，但目前尚缺乏對ETV長期治療的臨床觀察，及其與現有的主流核苷類似物如拉米夫定(LAM)長期療效對比的對照研究。 同時，這些核苷類似物在使用過程中遇到一系列難以回答的問題，

2、諸如：①初治患者應如何選擇核苷類抗病毒藥物；②核苷類似物耐藥的預防和處理；③核苷類似物可否聯合、序貫使用，如何使用；④停藥時機的把握等。我們注意到，核苷類似物的耐藥問題是上述問題的核心。目前核苷類似物的使用也主要把握兩點：一是充分發(fā)揮藥物的抗病毒功效，另一方面則是盡量避免耐藥的發(fā)生。然而目前臨床使用核苷類抗病毒藥物缺乏必要的實驗室依據，同時對治療過程中病毒變異的分子病毒學過程和耐藥發(fā)生機制缺乏深入的了解，這是制約核苷類似物科學合理使用的

3、關鍵問題。 準種概念的引入為我們客觀認識高變異病毒在宿主免疫和藥物等壓力下的運動規(guī)律提供了新的切入點。對HCV、HIV等高變異病毒的準種研究發(fā)現，這些病毒以種群選擇優(yōu)勢對抗環(huán)境壓力的改變，使種群得以延續(xù)。它們在宿主體內以多變異株的形式混合存在，在一定的外界壓力下以某一或某些對當前壓力具有選擇優(yōu)勢的變異株為優(yōu)勢準種，且準種群可隨著外界壓力的改變而發(fā)生演變以進一步適應環(huán)境。最近的研究發(fā)現，HBV種群在核苷類似物治療過程中也可發(fā)生類似

4、演變，且與HBV耐藥和抗病毒治療失敗密切相關。但由于均為個案研究，雖然為進一步的研究提供了線索，但仍對這一問題缺乏系統(tǒng)深入的理解。同時，目前的研究方法仍以“PCR-克隆-測序”為“金標準”，尚缺乏對HBv準種進行精確、簡便檢測和篩選的研究方法。 為探討上述問題，本研究選擇了36例接受ETV或LAM治療的慢性乙型肝炎患者進行了長達192周的隨訪觀察，其中17例LAM初治患者有14例接受了后續(xù)ETV序貫治療。我們對不同藥物治療的兩組

5、患者的血清HBV DNA和ALT水平進行了動態(tài)監(jiān)測，以比較兩種藥物對病毒抑制和肝功能恢復的療效。我們保留了全部血清樣本共200余份，并全部進行了“PCR-直接測序”，以了解耐藥發(fā)生情況，并比較兩種藥物的耐藥發(fā)生率。我們進一步采用國際認可的“金標準”“PCR-克隆-測序-序列分析”的方法，對6例發(fā)生臨床病毒學突破的患者以及4例未發(fā)生臨床病毒學突破的患者(陰性對照)的全程血清樣本進行了準種檢測，共測序2100余個，以系統(tǒng)深入地對LAM和ET