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1、目的:通過檢測(cè)HSP90β基因在白血病HL60細(xì)胞株及其耐藥的HL60/ATRA細(xì)胞中的表達(dá)差異,探討HSP90β基因在ATRA相關(guān)多藥耐藥性發(fā)生中的作用。
方法:采用少量、多次、遞增、反復(fù)ATRA體外培養(yǎng)的方法建立HL60/ATRA耐藥細(xì)胞株;用MTT法和流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(FCM),分別檢測(cè)HL60和HL60/ATRA細(xì)胞的增殖及細(xì)胞周期;RT-PCR、Westernblot法檢測(cè)HSP90β基因在HL60及HL60/A
2、TRA細(xì)胞中的表達(dá);通過MTT法檢測(cè)HL60和HL60/ATRA細(xì)胞對(duì)常用化療藥物(VCR、CTX、VP-16、ADM)敏感性。
結(jié)果:成功構(gòu)建了白血病HL60/ATRA耐藥細(xì)胞株;在mRNA和蛋白兩個(gè)水平均檢測(cè)到HSP90β,在耐藥株HL60/ATRA中的表達(dá)較HL60顯著增高(P<0.01);細(xì)胞周期和增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,HL60細(xì)胞和HL60/ATRA細(xì)胞均增殖良好,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);藥物敏感實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示
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