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文檔簡介
1、目的:通過檢測HSP90β基因在白血病HL60細胞株及其耐藥的HL60/ATRA細胞中的表達差異,探討HSP90β基因在ATRA相關多藥耐藥性發(fā)生中的作用。
方法:采用少量、多次、遞增、反復ATRA體外培養(yǎng)的方法建立HL60/ATRA耐藥細胞株;用MTT法和流式細胞檢測技術(FCM),分別檢測HL60和HL60/ATRA細胞的增殖及細胞周期;RT-PCR、Westernblot法檢測HSP90β基因在HL60及HL60/A
2、TRA細胞中的表達;通過MTT法檢測HL60和HL60/ATRA細胞對常用化療藥物(VCR、CTX、VP-16、ADM)敏感性。
結果:成功構建了白血病HL60/ATRA耐藥細胞株;在mRNA和蛋白兩個水平均檢測到HSP90β,在耐藥株HL60/ATRA中的表達較HL60顯著增高(P<0.01);細胞周期和增殖實驗結果顯示,HL60細胞和HL60/ATRA細胞均增殖良好,沒有統計學差異(P>0.05);藥物敏感實驗結果顯示
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