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文檔簡介
1、10-羥基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王漿的標志性物質,大約占蜂王漿的1.4%~2.0%,其結構式為 HO-CH2-(CH2)6-CH=CH-COOH(C10H18O3)。10-HDA具有抑菌、提高免疫力、抗輻射和降血脂等多種功效。
雖然10-HDA對細菌具有良好的抑制效果,但對其抑菌機理卻是知之甚少。因此,本論文以金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌為實驗菌株,主要從細胞生物學、生物化學和分子生物學等方面入手,對10-HDA的抑
2、菌機理進行較為系統(tǒng)的研究。取得的結果如下:
1、10-HDA生物活性的確定
為了確定與分析10-HDA的抑菌性能,采用牛津杯法,倍半稀釋法進行抑菌性能測定實驗。結果表明,10-HDA對多種病原細菌具有明顯的抑制作用,表現(xiàn)出廣譜抗菌活性,且抑菌效果隨著10-HDA濃度的增加顯著提高。其中,對金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度(MIC)均為0.62 mg/mL。
2、10-HDA對金黃色葡萄球菌細胞膜
3、及代謝活力的影響
通過對金黃色葡萄球菌生長曲線、細胞膜通透性、細胞代謝活力等方面的研究,探討10-HDA對金黃色葡萄球菌細胞膜的作用機理。結果表明10-HDA可以破壞金黃色葡萄球菌細胞的完整性,促使細胞膜通透性增加,使得胞內大量離子以及具有紫外吸收的大分子物質泄漏,細胞代謝發(fā)生紊亂。
3、10-HDA對枯草芽孢桿菌基因組DNA及蛋白合成的影響
以枯草芽孢桿菌為供試菌,采用凝膠阻滯實驗及原子力顯微鏡觀察10-
4、HDA與菌體 DNA結合情況,并采用 DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察10-HDA作用后菌體DNA含量的變化,以及10-HDA對菌體基因組PCR的影響。結果顯示,當10-HDA濃度達到0.62 mg/mL時,菌體中基因組DNA的合成量明顯減少,而且10-HDA與細菌基因組DNA緊密結合。對基因組DNA的PCR影響實驗進一步證明,當PCR體系中10-HDA的濃度達到1.0 mg/mL時,DNA的合成被完全阻礙。
綜上所述,通過實驗,我們
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