多西紫杉醇聯(lián)合得力生對肺腺癌細胞株A549細胞生長的影響及其機制的體外研究.pdf

1、目的： 探討多西紫杉醇、中成藥得力生及兩藥聯(lián)合對肺癌細胞株A549細胞生長、基因表達的影響及其機制和相互作用形式。 方法： 采用MTT法測定細胞增殖抑制率，在顯微鏡下觀察細胞凋亡的形態(tài)特點，應(yīng)用流式細胞儀檢測細胞凋亡率，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng)（RT-PCR）法測定凋亡相關(guān)基因、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因及促血管新生基因mRNA的表達變化。 結(jié)果： （1）得力生、多西紫杉醇及兩藥聯(lián)合作用48小時后，A549細胞存

2、活率均明顯降低，與對照組相比，差異有統(tǒng)計意義（P均<0.05）；得力生與多西紫杉醇聯(lián)合處理A549細胞，其作用強度大于任何一種單藥（P均<0.05），兩藥間相互作用形式表現(xiàn)為相加作用，甚至為協(xié)同作用。（2）多西紫杉醇聯(lián)合得力生作用A549細胞24小時后亦可見典型的凋亡形態(tài)學改變。進一步的流式檢測結(jié)果表明：得力生與多西紫杉醇聯(lián)合處理后，其對A549細胞早期凋亡與得力生、多西紫杉醇單藥作用強度相當，但其對A549細胞晚期凋亡的影響大于任何一

3、種單藥（P均<0.05）。（3）RT-PCR結(jié)果顯示，得力生單藥作用于A549細胞24小時后，survivin、β1整合素亞基基因的mRNA表達明顯降低，與對照組相比，差異有統(tǒng)計意義（P均<0.05）；但α5整合素亞基、VEGF和bFGF基因的mRNA表達無明顯下降，與對照組相比，差異無統(tǒng)計意義（P>0.05）。（4）多西紫杉醇單藥作用于A549細胞24小時后，α5整合素亞基基因、bcl2/bax基因表達比例明顯降低，與對照組相比，差異

4、有統(tǒng)計意義P均<0.05）；但VEGF、bFGF、β1整合素亞基基因的mRNA與對照組相比表達無明顯下降，差異無統(tǒng)計意義（P>0.05）。（5）得力生與多西紫杉醇聯(lián)合處理后，其對A549細胞survivin、β1整合素亞基、α5整合素亞基基因表達和bcl2/bax基因表達比例均有明顯抑制作用（P均<0.05），但對VEGF、bFGF基因表達無影響（P>0.05）。進一步研究顯示，得力生與多西紫杉醇聯(lián)合作用后，對A549細胞survivi

5、n、β1整合素亞基基因mRNA表達的影響與得力生單藥相比，差異無統(tǒng)計學意義。多西紫杉醇與得力生聯(lián)合作用后，對A549細胞α5整合素亞基基因、bcl-2/bax比值的影響與多西紫杉醇單藥相比，差異無統(tǒng)計學意義。即在基因水平上兩藥間相互作用形式為：兩種單藥互不干擾，均能發(fā)揮各自對某些基因表達的抑制作用，且具有互補性。 結(jié)論： 多西紫杉醇聯(lián)合得力生可明顯抑制A549細胞增殖，誘導(dǎo)A549細胞凋亡，且與任一單藥相比，兩藥聯(lián)合作用