豚鼠內(nèi)耳中縫隙連接及連接蛋白26、32的表達(dá)、分布及功能特性研究.pdf

1、目的：研究豚鼠耳蝸組織中縫隙連接結(jié)構(gòu)以及連接蛋白26和32表達(dá)、分布及其意義。 方法：分別采用RT-PCR、western-blot、透射電鏡、免疫組織化學(xué)和激光共聚焦雙重免疫熒光染色方法觀察豚鼠耳蝸中縫隙連接及連接蛋白26和32的分布情況。 結(jié)果：RT-PCR和western-blot法顯示，在豚鼠內(nèi)耳組織中連接蛋白26、32的基因均有表達(dá)。同時，通過透射電鏡觀察到在豚鼠的內(nèi)耳中，尤其是在支持細(xì)胞和毛細(xì)胞間存在著大量的

2、縫隙連接結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)在高倍電鏡下呈典型的7層膜結(jié)構(gòu)；另外，在內(nèi)螺旋溝細(xì)胞間也可見到有縫隙連接的存在。免疫組化染色顯示連接蛋白26廣泛分布在毛細(xì)胞和支持細(xì)胞間、螺旋緣和血管紋區(qū)域內(nèi)；連接蛋白32則在毛細(xì)胞下支持細(xì)胞間質(zhì)中，以及血管紋區(qū)域，而螺旋神經(jīng)結(jié)處無分布；借助免疫熒光雙重染色方法，我們發(fā)現(xiàn)兩種蛋白的分布區(qū)域既有重疊，也有區(qū)別。被FITC標(biāo)記的連接蛋白26在激光共聚焦顯微鏡下呈綠色熒光，而被cy3標(biāo)記的連接蛋白32發(fā)出紅色熒光，在豚鼠的