血紅蛋白對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞磷酸化肌球蛋白輕鏈及緊密連接蛋白ZO-1和claudin-5的影響.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 0 級(jí)碩士學(xué)位論文血紅蛋白對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞磷酸化肌球蛋白輕鏈及緊密連接蛋白Z O ．1 和c l a u d i n ．5 的影響E f f e c t so f h e m o g l o b i n o n p h o s p h o r y l a t e d m y o s i n l i g h tc h a i na n dt i g h t j u n c t i o np r o t e i nZ O

2、- 1 a n dc l a u d i n - 5 o f e n d o t h e l i a l c e l l s課題來(lái)源： 自選課題學(xué)位申請(qǐng)人 鄧心情導(dǎo) 師 姓 名 陳神招 副教授、副主任醫(yī)師專 業(yè) 名 稱 外科學(xué)( 神經(jīng)外科)培 養(yǎng) 類 型 學(xué)術(shù)型培 養(yǎng) 層 次 碩士研究生所在 學(xué) 院 研究生學(xué)院答辯委員會(huì)主席 陸永建教授答辯委員會(huì)成員 全偉教授牟永告教授李方成教授方陸雄教授論文評(píng)閱人 牟永告教授汪求精教授2 0 1 3

3、年4 月 12 日 廣州中文摘要是腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接中的特異性蛋白【7 1 。O h t s u k i 等【8 1 通過(guò)培養(yǎng)大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，c l a u d i n ．5 的外源性表達(dá)可誘導(dǎo)B B B 的形成。這些研究表明，c l a u d i n ．5 是形成B B B 緊密連接的重要分子元件之一。Z O ．1 是第一個(gè)被證實(shí)的緊密連接附著蛋白，屬于膜相關(guān)鳥(niǎo)苷酸激酶樣蛋白( M A G U K ) 家族，主要由P

4、 D Z 結(jié)構(gòu)域、S H 3 ( S r c 同源3 ) 結(jié)構(gòu)域和鳥(niǎo)苷酸激酶( G u K ) 結(jié)構(gòu)域所構(gòu)成。其中Z O ．1 可維持上皮細(xì)胞極性、間接參與細(xì)胞骨架的形成，是細(xì)胞緊密連接的重要組成蛋白之一。另外，Z O ．1 還可參與屏障作用的信號(hào)傳導(dǎo)、癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移等作用【9 1 。各種因素引起B(yǎng) B B 結(jié)構(gòu)和功能破壞是導(dǎo)致腦出血后血管源性腦水腫發(fā)生、發(fā)展的主要原因。李兵等通過(guò)向大鼠腦內(nèi)注入自體血后發(fā)現(xiàn)緊密連接蛋白o(hù) c c l u

5、d i n 表達(dá)下降，同時(shí)出現(xiàn)B B B 通透性升高【1 0 】。腦出血發(fā)生后，炎性因子、血紅蛋白分解產(chǎn)物、凝血酶、氧化應(yīng)激、補(bǔ)體和基質(zhì)會(huì)屬蛋白酶等因素均可導(dǎo)致B B B 的破壞。血紅蛋I 圭t ( h e m o g l o b i n ，H b ) 是高等生物體內(nèi)負(fù)責(zé)運(yùn)載氧的一種蛋白質(zhì)，是血液中紅細(xì)胞的主要成分。人體內(nèi)的H b 由兩個(gè)a 弧基及兩個(gè)B 亞基構(gòu)成，每個(gè)亞基由一條珠蛋白及一個(gè)血紅素分子構(gòu)成。腦出血時(shí)，血液通過(guò)破裂的血管進(jìn)

6、入腦內(nèi)后形成血腫，H b 是血腫主要構(gòu)成成分之一，主要由大量紅細(xì)胞崩解釋放。研究表明，腦出血后紅細(xì)胞崩解釋放的H b 是導(dǎo)致腦出血后血管源性腦水腫發(fā)生發(fā)展的主要因素之一。X i 等向大鼠腦內(nèi)注入完整紅細(xì)胞3 d 后出現(xiàn)B B B 通透性增加及腦水腫形成，而注入裂解的紅細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，2 4 h 內(nèi)即有B B B 通透性顯著增加和腦水腫顯著形成【?2 1 。這一研究提示腦出血后完整的紅細(xì)胞不會(huì)引起腦水腫的發(fā)生，而紅細(xì)胞崩解后釋放的H b 可能

7、參與了腦出血后腦水腫的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。R a n d a l 等在對(duì)H b 攜氧載體等研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，H b 作用于體外培養(yǎng)的牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞后，短時(shí)問(wèn)內(nèi)即可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞肌動(dòng)蛋白應(yīng)力纖維的產(chǎn)，1 -及細(xì)胞問(wèn)隙的形成并可增加個(gè)肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性【1 3 】。S i l v a 等研究證據(jù)表明，H b 氧化后可以作為炎癥介質(zhì)進(jìn)而誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞?現(xiàn)細(xì)胞骨架改變等炎癥反應(yīng)表現(xiàn)I l 4 1 。這些研究表明，H b 可以直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)而誘