趨化因子CXCL14在乳腺癌中的作用及其意義.pdf

1、復旦大學碩士研究生畢業(yè)論文趨化因子CXCLl4在乳腺癌中的作用及其意義院系專業(yè)Y‘m研究生學位予衛(wèi)L導師弋r歲oP導師組成員腫瘤醫(yī)院腫瘤學顧筱莉碩士歐周羅教授邵志敏教授本課題受國家自然科學基金(項目號：30570695及81172506)資助復旦大學碩上論文中文摘要目的：了解趨化因子CXCLl4在人乳腺癌中的組成性、誘導性表達及其在乳腺癌細胞增殖及侵襲等方面發(fā)揮的作用，以及導致上述乳腺癌細胞生物學行為變化的可能機制。通過動物體內實驗探索

2、趨化因子CXCLl4對乳腺癌細胞成瘤性和轉移性的影響及其作用機制，以乳腺癌患者的手術切除標本為對象分析趨化因子CXCLl4表達與乳腺癌臨床特征相關性。方法：采用RT—PCR及Westernblot檢測2種正常乳腺上皮細胞系(HBL一100、MCF—IOA)及6種人乳腺癌細胞系(MCF一7、MDA—MB一231、MDAMB一231HM、ZR一75—30、SK—BR一3、BT474))中CXCLl4的基因表達和蛋白質水平，通過穩(wěn)定轉染誘導M

3、DAMB231HM細胞系過表達CXCLl4，采用CCK一8法及Transwell法分析轉染前后及空載體組細胞增殖、凋亡及細胞侵襲性的改變。取SCID小鼠15只，在乳腺脂肪墊(mfp)分別注射MDA—MB一231HM—CXCLl4、MDA—MB一231HM—vector和MDAMB231HM細胞，觀察移植瘤大小、體積、肺轉移數目及CD34表達情況。免疫組化法檢測208例乳腺癌患者癌組織中CXCLl4表達，并結合臨床資料分析CXCLl4的表

4、達與乳腺癌預后的相關性。結果：RT—PCR及Westernblot結果均顯示CXCLl4在乳腺癌細胞系中呈現(xiàn)低表達，其中，MDAMB231HM細胞系中表達量最低，通過構建質粒轉染誘導MDA—MB一231HM過表達CXCLl4，建立MDA—MB一231HM—CXCLl4細胞系，MDAMB231HMCXCLl4細胞系與MDAMB231HM細胞系在細胞增殖、凋亡及侵襲方面的差異具有統(tǒng)計學上的顯著性意義(pO01)。在動物實驗中，MDAMB一2

5、31HM—CXCLl4移植瘤的腫瘤大小、體積及肺轉移灶數目與MDA—MB一231HM移植瘤的差異具有統(tǒng)計學上的顯著性意義(pO01)，同時可見MDA—MB一231HMCXCLl4移植瘤內微血管密度降低。免疫組織化學結果顯示，CXCLl4在208例乳腺癌患者中陽性表達率為2548％，其表達與淋巴結轉移呈負相關，而與臨床預后呈正相關。結論：體外、體內及臨床標本研究的結果均表明，趨化因子CXCLl4可抑制乳腺癌細胞的生長及轉移，對患者具有保護