氨氯吡咪對預(yù)收縮大鼠胸主動脈血管環(huán)的作用及其機制探討.pdf

1、目的：氨氯吡咪(AM，amiloride，又名阿米洛利)是常用的保鉀利尿藥。作為Na+/H+交換阻滯劑，氨氯吡咪對心肌的作用成為研究的熱點，但在血管方面的研究甚少。本實驗采用離體血管張力記錄系統(tǒng)，觀察氨氯吡咪對大鼠胸主動脈血管環(huán)的作用并探討其可能機制。
　　 方法：采用大鼠離體胸主動脈血管環(huán)記錄法。將大鼠斷頭處死，開胸取出胸主動脈，兩端固定，剔除干凈周圍脂肪組織，剪成長度約2～3mm的血管環(huán)，血管環(huán)用兩根不銹鋼微型掛鉤從管腔穿過

2、，水平懸掛在浴漕內(nèi)，下方固定，上方由一細鋼絲連于張力換能器，經(jīng)BL-420F生物機能實驗分析系統(tǒng)記錄血管環(huán)的張力變化。浴漕內(nèi)含有通以100％O2、pH值為7.4、37℃的生理鹽溶液(physiological salt solution,PSS)，基礎(chǔ)張力調(diào)為2g，平衡1h后開始實驗。觀察氨氯吡咪(AM)對氯化鉀(KCl，60mmol/L)、去甲腎上腺素(NE，1×10-6mol/L)誘發(fā)大鼠離體胸主動脈環(huán)收縮的影響，同時觀察不同工具藥

3、對其作用的影響以及AM對血管環(huán)依賴外鈣性收縮和依賴內(nèi)鈣性收縮的影響。
　　 結(jié)果：(1)AM(1×10-6～3×10-5 mol/L)對基礎(chǔ)狀態(tài)的大鼠胸主動脈血管環(huán)無顯著作用。(2)AM(1×10-6 mol/L～3×10-5mol/L)對NE(1×10-6mol/L)或KCl(60 mmol/L)誘發(fā)的血管收縮能產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用，其logEC50分別為-4.35±0.01和-4.28±0.04，與溶劑對照組比較有統(tǒng)計學

4、差異(P＜0.01)。(3)在無Na+的PSS液中，AM(1×10-6mol/L～3×10-5 mol/L)對NE(1×10-6mol/L)或KCl(60 mmol/L)誘發(fā)的血管收縮仍能產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用，其logEC50分別為-4.24+0.02和-4.13±0.01，與含Na+的PSS液中AM的舒張幅度比較，沒有統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。(4)AM(1×10-6 mol/L～3×10-5mol/L)對NE(1×10-6mo

5、l/L)或KCl(60 mmol/L)引起的去內(nèi)皮的大鼠主動脈血管環(huán)的張力變化亦有濃度依賴性的舒張作用，但明顯弱于對內(nèi)皮完整血管環(huán)的舒張作用，其logEC50分別為-4.18±0.02和-4.16±0.01，與內(nèi)皮完整組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.01～0.05)。(5)在NE(1×10-6 mol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)上，加入L-NAME后，AM舒張血管的作用減弱，與未加L-NAME組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。在NE(1×10-6

6、mol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)上，加入Indo后，AM舒張血管的作用未見明顯變化，與未加Indo組比較沒有統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。(6)在NE(1×10-6mol/L)預(yù)收縮的血管環(huán)上，加入K+通道阻滯劑TEA(1×10-2mol/L)、BaCl2(1×10-3 mol/L)后，可以抑制AM的血管舒張作用，與未加阻斷藥組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，而Gli(1×10-5mol/L)，4-AP(1×10-3 mol/L)對AM舒血管

7、作用無明顯影響，與未加阻影響，與未加阻斷藥組比較沒有統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。(7)在無鈣的生理鹽溶液中，用3×10-5 mol/L的AM預(yù)孵后，加入NE(1×10-6 mol/L)后，可見到一短暫的收縮，繼續(xù)加入2.5×10-3 mol/L的CaCl2，可見血管環(huán)出現(xiàn)收縮。與用溶劑預(yù)孵者比較，AM可以明顯減弱NE和CaCl2收縮血管的作用。
　　 結(jié)論：1、AM對靜息狀態(tài)下的胸主動脈環(huán)不產(chǎn)生舒張作用。2、AM對NE(1×10

8、-6mol/L)或KCl(60 mmol/L)預(yù)收縮的內(nèi)皮完整的大鼠離體胸主動脈有濃度依賴性的舒張作用。3、AM對NE(1×10-6mol/L)或KCl(60mmol/L)預(yù)收縮的去內(nèi)皮的大鼠離體胸主動脈有濃度依賴性的舒張作用，但明顯弱于對內(nèi)皮完整血管環(huán)的舒張作用。4、AM對胸主動脈的舒張作用為部分內(nèi)皮依賴性，機制可能與內(nèi)皮釋放NO有關(guān)。5、AM對胸主動脈的舒張作用與KATP通道和Kv通道無關(guān)，與KCa通道和KiR通道有關(guān)。6、AM可通