槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠心肌、肝臟損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠心肌、肝臟氧化損傷的保護(hù)作用；探討槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠心肌線粒體氧化應(yīng)激和功能紊亂的拮抗作用；探討槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠肝臟炎性反應(yīng)的干預(yù)效應(yīng)及對(duì)NF-κB/IκBα介導(dǎo)炎癥的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：48只成年雄性BALB/c小鼠，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)+槲皮素20mg/(kg·d)組、運(yùn)動(dòng)+槲皮素50mg/(kg·d)組、運(yùn)動(dòng)+槲皮素100mg/(kg·d)組和槲皮素100mg/(kg·d

2、)組。根據(jù)Marra法并進(jìn)行適當(dāng)修改建立急性劇烈運(yùn)動(dòng)損傷動(dòng)物模型。槲皮素干預(yù)四周，在干預(yù)期后10天，運(yùn)動(dòng)組先進(jìn)行2天適應(yīng)性訓(xùn)練，休息2天后，開始正式運(yùn)動(dòng)。初始速度為10m/min，在10min內(nèi)逐漸增加負(fù)荷至28 m/min，坡度為5度，持續(xù)90min，采用以上運(yùn)動(dòng)方式連續(xù)運(yùn)動(dòng)7天，末次運(yùn)動(dòng)完成后即刻處死小鼠。
　　結(jié)果：
　　1、與正常對(duì)照組相比，高劑量槲皮素干預(yù)明顯降低劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的小鼠血清CK-MB（P<0.01）、A

3、ST（P<0.01）和ALT（P<0.01）水平上升；槲皮素干預(yù)明顯抑制劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的小鼠心肌和肝臟的氧化應(yīng)激以及超微病理結(jié)構(gòu)異常。
　　2、槲皮素干預(yù)明顯拮抗了劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的小鼠心肌線粒體氧化應(yīng)激以及心肌線粒體膜電位（P<0.01）和呼吸控制率（RCR）（P<0.05）的下降。
　　3、劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致小鼠血清TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）和IL-10（P<0.05）水平顯著升

4、高，槲皮素干預(yù)明顯降低劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠血清TNF-α（P<0.05）、IL-1β（P<0.05）和IL-6（P<0.05）水平。
　　4、與正常對(duì)照組相比，劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠肝臟IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）和IL-10（P<0.01）mRNA水平顯著升高，槲皮素干預(yù)降低了運(yùn)動(dòng)小鼠肝臟IL-1β（P<0.05）和IL-6（P<0.01）mRNA水平。
　　5、與正常對(duì)照組相比，劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致小鼠肝臟iNOS（P<0

5、.01）、COX-2（P<0.01）和ICAM-1（P<0.01）mRNA表達(dá)分別增加3.2倍、1.6倍和0.7倍，槲皮素干預(yù)明顯抑制了運(yùn)動(dòng)小鼠肝臟iNOS（P<0.01）、COX-2（P<0.05）和ICAM-1（P<0.05）mRNA水平升高。槲皮素干預(yù)抑制了劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的小鼠肝臟iNOS、COX-2和ICAM-1蛋白表達(dá)增加。
　　6、采用免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)，運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡觀察到槲皮素干預(yù)明顯抑制劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的小鼠肝細(xì)胞

6、NF-κB轉(zhuǎn)位入核。
　　7、與正常對(duì)照組相比，劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致肝臟IκBα蛋白表達(dá)降低0.59倍（P<0.05），P-IκBα蛋白表達(dá)增加1.7倍（P<0.01）；槲皮素干預(yù)提高IκBα蛋白表達(dá)（P<0.05），同時(shí)抑制P-IκBα蛋白表達(dá)（P<0.05），表明槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的IκBα磷酸化有一定抑制作用。劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠肝臟P-IKKα表達(dá)比正常對(duì)照組增加9.9倍（P<0.01），槲皮素明顯抑制P-IKKα的高表達(dá)（P<0.01

7、）。
　　8、劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠肝細(xì)胞核內(nèi)NF-κB與DNA結(jié)合能力提高115％（P<0.01），槲皮素干預(yù)明顯抑制運(yùn)動(dòng)小鼠肝細(xì)胞核內(nèi)NF-κB與DNA的結(jié)合活性（P<0.01）。
　　結(jié)論：槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的小鼠心肌和肝臟氧化損傷具有明顯保護(hù)作用；槲皮素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)小鼠心肌線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷和功能紊亂的拮抗作用，可能與其抗氧化作用有關(guān)；槲皮素可能通過調(diào)節(jié)P-IKKα/IκBα/P-IκBα信號(hào)通路而抑制NF-κB轉(zhuǎn)錄激活，發(fā)揮