USPIO增強(qiáng)MRI檢測(cè)人野生型P53基因轉(zhuǎn)染動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的有效性研究.pdf

1、目的：近年研究證明，動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，As)斑塊破裂是急性心血管事件的主要病因。一般認(rèn)為，具有薄纖維帽，大脂質(zhì)核心及大量激活巨噬細(xì)胞的斑塊不穩(wěn)定，易于破裂。易損斑塊(VP)的早期識(shí)別和干預(yù)對(duì)于急性心血管事件的預(yù)防具有十分重要的意義，本研究旨建立兔腹主動(dòng)脈粥樣硬化VP的動(dòng)物模型，探討USPIO增強(qiáng)MRI檢測(cè)人野生型P53基因轉(zhuǎn)染動(dòng)脈粥樣硬化VP的可行性及有效性。
　　方法：1.模型的建立：健康雄性新西蘭大

2、白兔40只，采用球囊導(dǎo)管損傷腹主動(dòng)脈內(nèi)膜，并給予高脂飲食飼養(yǎng)8周，8周后在MRI指引下將重組性腺病毒介導(dǎo)的人野生型P53基因轉(zhuǎn)染腹主動(dòng)脈斑塊最大處，建立兔VP模型。
　　2.藥物激發(fā)：病毒轉(zhuǎn)染2周后，對(duì)實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行藥物觸發(fā)：中國(guó)斑點(diǎn)蝰蛇毒0.15mg/kg腹膜下注射，30min后耳緣靜脈注射組胺0.02mg/kg，于處死動(dòng)物前24 h和48h給予2次藥物觸發(fā)。
　　3.MRI檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)家兔先經(jīng)耳緣靜脈注射3％戊巴比妥鈉(30

3、mg/kg)，采用PHILIPS，Gyroscan Intera1.5T MRI掃描儀，膝關(guān)節(jié)線圈；橫斷面掃描范圍包括右腎動(dòng)脈至髂總動(dòng)脈范圍。經(jīng)耳緣靜脈注入U(xiǎn)SPIO0.1mmol/kg后，行MRI增強(qiáng)掃描，并間隔24h重復(fù)掃描一次，連續(xù)觀察5d，觀察VP的大小、分布、組織結(jié)構(gòu)、血管狹窄率及血管重構(gòu)等影像學(xué)特征。
　　4.組織病理學(xué)檢測(cè)：觀察基因轉(zhuǎn)染部位斑塊破裂及血栓形成的發(fā)生率，測(cè)量VP處血管重構(gòu)情況。利用HE染色和Masson

4、三色染色，觀察破裂斑塊和未破裂斑塊的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)；利用普魯士藍(lán)鐵染色觀察巨噬細(xì)胞鐵的沉積透射電鏡觀察斑塊破裂處的超微結(jié)構(gòu)改變及細(xì)胞的凋亡情況。
　　結(jié)果：1.38只新西蘭大白兔成功建立動(dòng)物模型；組織切片證實(shí)動(dòng)脈硬化斑塊形成，可見斑塊的纖維帽，脂質(zhì)核心和鈣化，部分切片普魯士蘭染色可見鐵顆粒聚集。
　　2.T2*WI上監(jiān)測(cè)管壁SNR變化曲線顯示，USPIO增強(qiáng)即刻至觀察的四天里T2*WI上病變區(qū)SNR的變化趨勢(shì)是起始逐漸下降，第4

5、天達(dá)到最低點(diǎn)然后開始回升，這說明巨噬細(xì)胞對(duì)鐵顆粒吞噬的峰值時(shí)間在96h左右，達(dá)到最大負(fù)性強(qiáng)化峰值。
　　3.38只家兔的38根腹主動(dòng)脈誘發(fā)不同程度的動(dòng)脈粥樣硬化改變，按照AHA/Stary分級(jí)，104個(gè)血管片段均為VP，其中Ⅳ級(jí)14個(gè)，Ⅴ級(jí)29個(gè)和Ⅵ級(jí)61個(gè)。MRIT2*WI掃描發(fā)現(xiàn)血管腔內(nèi)可見低信號(hào)，MRI掃描序列形成96個(gè)VP，92個(gè)血管片段在MRI圖像和病理學(xué)檢查之間相匹配。
　　4.兔MRI圖像所能發(fā)現(xiàn)的異常改變有管

6、腔環(huán)形狹窄，呈扁平狀或新月狀向管腔內(nèi)突起的斑塊。USPIO增強(qiáng)T2*WI表現(xiàn)為斑塊中央信號(hào)減低，其負(fù)性強(qiáng)化峰值出現(xiàn)在注射對(duì)比劑后96h。
　　5.電鏡結(jié)果：VSMC數(shù)目明顯減少，胞體縮小，胞漿中可見大量的溶酶體、糖原顆粒，調(diào)亡小體多見。
　　結(jié)論：1.USPIO顆粒能被動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的巨噬細(xì)胞所吞噬，利用該對(duì)比劑增強(qiáng)MRI可特異性識(shí)別不穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣斑塊。
　　2.USPIO增強(qiáng)MRI檢測(cè)人野生型P53基因轉(zhuǎn)染動(dòng)脈粥