電針風(fēng)府穴對阿茨海默病模型大鼠海馬GDNF及GFR-α1受體的影響研究.pdf

1、目的：阿爾茨海默癥(Alzheimer，sdisease，AD)是一種發(fā)生于老年期或老年前期的一種慢性進行性的神經(jīng)變性疾病，是老年人的常見病、多發(fā)病。其病理改變主要為大腦皮層、海馬、基底核等萎縮，多種神經(jīng)元尤其是膽堿能神經(jīng)元的原發(fā)性變性，由淀粉樣蛋白沉積形成的老年斑和神經(jīng)原纖維纏結(jié)的出現(xiàn)和增多等。其首要臨床癥狀是智力、記憶力、感官定向能力、判斷力、語言思維能力不可逆地進行性退化，并常伴有性格改變，其發(fā)病率隨年齡增長而增加。目前對于AD的

2、臨床治療尚無特效藥物治療，一般都是改善認(rèn)知功能和用一些促進腦部代謝的藥物，目的是控制癥狀，但并不能減緩或者挽救大多種神經(jīng)元尤其是膽堿能神經(jīng)元的原發(fā)退行性病變。所以，尋找一個安全，新穎，便捷，經(jīng)濟的治療方法已經(jīng)成為了治療AD的迫切需要。而近年來，針灸因能較好改善AD認(rèn)知功能狀態(tài)，且無毒副作用，對全面提高患者生活質(zhì)量具有一定的優(yōu)勢，且已作為一種獨特、安全、方便的治療方法已經(jīng)越來越多地運用于臨床，取得了較為肯定的療效。本課題旨在研究電針對AD

3、大鼠腦內(nèi)海馬膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子及GFR—α1受體表達(dá)的影響，探討電針對AD治療作用及其作用機理，為針灸臨床提供實驗依據(jù)。 方法：用10％水合氯醛(4ml/Kg)腹腔注射麻醉大鼠，頭部備皮，頭顱平位固定于大鼠WDT—Ⅱ微電極推進器腦立體定位儀上，以活力碘消毒手術(shù)區(qū)皮膚，沿顱部正中矢狀線剪開頭皮和骨膜，再以小棉球蘸取雙氧水輕輕涂搽骨面，充分暴露前囟。參照Paxinos[2]等圖譜確定雙側(cè)海馬兩點注射坐標(biāo)：第一點為前囟前3.5m

4、m，中線右側(cè)2.0mm，硬膜下2.7mm；第二點為前囪前3.5mm，中線左側(cè)2.0mm，硬膜下2.7mm。用牙科鉆按上述兩點坐標(biāo)鉆孔(直徑約1mm)，然后以微量注射器向每一點內(nèi)注射Aβ25-353μ1。具體方法：以5μ1微量注射器抽取3μ1Aβ25-35溶液(5μg/μ1，內(nèi)含0.2％VitC)，將注射器垂直固定于WDT—Ⅱ微電極推進器腦立體定位儀上，緩慢進針(注射速度0.5μ1/min)，注射完畢留針5min，以1.0mm/min速度

5、緩慢退針。兩點注射完畢后明膠海綿填塞顱骨孔，縫合頭皮；假手術(shù)組用上述同樣操作方法和坐標(biāo)，僅注射含0.2％VitC的生理鹽水。造模四周后進行Morris水迷宮行為學(xué)檢測，記錄1min內(nèi)大鼠是否找到平臺，2min內(nèi)找到平臺即為成功AD模型．將造模成功的大鼠隨機分成模型組和電針組。電針組取風(fēng)府穴進行治療。治療結(jié)束后用免疫組織化學(xué)方法檢測各組海馬膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子及GFR—α1受體陽性細(xì)胞數(shù)量。檢測結(jié)果通過SPSS11.0軟件包進行統(tǒng)計處

6、理。 結(jié)果：(1)造模后AD模型大鼠平均逃避潛伏期較造模前明顯延長；電針能使AD模型大鼠潛伏期明顯縮短(2)造模后AD模型大鼠跨越平臺次數(shù)較造模前明顯減少；電針能使AD模型大鼠過臺次數(shù)明顯增加；(3)電針組海馬膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子及GFR—α1陽性神經(jīng)元數(shù)量較模型組及正常組顯著增加(P＜0.05)。 結(jié)論：(1)電針風(fēng)府可提高AD模型大鼠海馬GDNF表達(dá)顯著增加，從而在一定程度上阻止膽堿能神經(jīng)元細(xì)胞凋亡過程，達(dá)到保護